Ассоциация между частотами встречаемости однонуклеотидных полиморфизмов в генах ZNF366 и VEZT и риском развития наружного генитального эндометриоза: данные по российской популяции

Пшеничнюк Е.Ю., Кузнецова М.В., Бурменская О.В., Кочеткова Т.О., Непша О.С., Трофимов Д.Ю., Адамян Л.В.

ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва
Цель исследования. Определить частоту встречаемости rs10859871 и rs4703908 среди женщин с различными формами наружного генитального эндометриоза (НГЭ) (эндометриоидные кисты яичников, глубокий инфильтративный эндометриоз и эндометриоз брюшины малого таза) в российской популяции. Материал и методы. Коллекция: образцы периферической крови от 143 пациенток с НГЭ и 75 пациенток без этого заболевания. Сбор образцов производился непосредственно во время операции. ДНК всех образцов была амплифицирована с праймерами на участки генома rs10859871 и rs4703908. Последовательности фрагментов были определены путем секвенирования методом Сенгера. Генотипирование аллельных состояний каждого однонуклеотидного полиморфизма проводилось визуально по хроматограммам с помощью программы BioEdit. Результаты. Выявлена положительная ассоциация гетерозиготного генотипа C/G локуса rs4703908 и риска развития эндометриоидных кист яичников (OR=1,78; 95%CI: 0,88-3,62; p>0,05) и глубокого инфильтративного эндометриоза (OR=2,02; 95%CI: 0,85-4,73; p>0,05). Выявлена положительная ассоциация C/G локуса rs4703908 и риска развития эндометриоза брюшины малого таза (OR=1,24; 95%CI: 0,49-3,16; p>0,05), однако OR не превышало 1,5. Выявлена положительная ассоциация гомозиготного генотипа СС локуса rs10859871 и риска развития эндометриоидных кист яичников (OR=5,61; 95%CI: 1,8-17,49; р<0,01), глубокого инфильтративного эндометриоза (OR=5,92; 95%CI: 1,68-20,83; p<0,01) и эндометриоза брюшины малого таза (OR=4,44; 95%CI: 1,15-17,07; p<0,05) по сравнению с условно здоровыми женщинами основной группы сравнения. Отмечается отрицательная ассоциация гомозиготного генотипа АА локуса rs10859871 и риска развития эндометриоидных кист яичников (OR=0,77; 95%CI: 0,40-1,45; p>0,05), глубокого инфильтративного эндометриоза (OR=0,44; 95%CI: 0,19-1,00; p<0,05), эндометриоза брюшины малого таза (OR=0,58; 95%CI: 0,25-1,38; p<0,05). Заключение. Гетерозиготный генотип C/G локуса rs4703908, расположенный вблизи ZNF366 гена, связан с повышенным риском развития эндометриоидных кист яичников и глубокого инфильтративного эндометриоза в российской популяции. Гомозиготный генотип СС локуса rs10859871, расположенный вблизи VEZT гена, обеспечивает значительно более высокий риск развития всех форм НГЭ в российской популяции (аутосомно-рецессивная модель наследования). Гомозиготный генотип АА локуса rs10859871 выполняет протективную роль и снижает риск развития эндометриоидных кист яичников, глубокого инфильтративного эндометриоза, эндометриоза брюшины малого таза. Результаты нашего исследования делают rs10859871 вероятным кандидатным маркером, тестирование по которому может выявлять повышенную вероятность развития НГЭ у женщин российской популяции.

Ключевые слова

эндометриоз
эндометриоидные кисты яичников
глубокий инфильтративный эндометриоз
ZNF366
VEZT

Эндометриоз – процесс, при котором за пределами полости матки происходит доброкачественное разрастание ткани, по морфологическим и функциональным свойствам подобной эндометрию [1].

В структуре гинекологической заболеваемости эндометриоз занимает 3-е место после воспалительных заболеваний и миомы матки, приводя к значительным нарушениям репродуктивной функции, стойкому болевому синдрому (71–87%) и бесплодию (21–47%). Эндометриоз поражает 10% женщин репродуктивного возраста и 35–50% женщин с тазовой болью и бесплодием [1–3].

Причины развития эндометриоза до настоящего времени неизвестны, однако предполагается, что важную роль играют многочисленные факторы окружающей среды и наследственные факторы [4, 5].

На основании изучения 3096 близнецов наследуемость эндометриоза (пропорция наличия болезни к наследственным факторам) была оценена в пределах 52% [5].

Проведенные исследования по полногеномному поиску ассоциаций (англ. GWAS, Genome-Wide Association Studies) позволили определить некоторые однонуклеотидные полиморфизмы (SNPs, Single nucleotide polymorphism), связанные с предрасположенностью к развитию заболевания [6].

Проведено четыре GWAS-исследования: два GWAS были опубликованы в 2010 г. на данных по японской популяции [7, 8]; GWAS на женщинах Европы было проведено в 2011 г. Международным Консорциумом EndoGene, в него также вошли данные по населению Австралии и Великобритании с независимым анализом аналогичных данных по американской популяции [9]; американское GWAS было проведено на женщинах европеоидной расы и опубликовано в 2013 г. [10].

В 2014 г. был проведен метаанализ, основанный на четырех GWAS-исследованиях и включивший 11 506 женщин с эндометриозом и 32 678 здоровых женщин как группу контроля; исследование было выполнено на женщинах европейской (Австралия, Бельгия, Италия, Великобритания и США) и японской популяций. Найдено 9 локусов связанных с развитием эндометриоза, из которых шесть (rs7521902, rs1270667, rs13394619, rs7739264, rs1537377 и rs10859871) определялись при заболевании наиболее часто [5, 6]: rs7521902 расположенный вблизи WNT4, rs1270667 на 7p15.2, rs13394619 в эстроген-зависимом регуляторе роста рака груди 1 (GREB1, Growth regulation by estrogen in breast cancer 1), rs7739264 около ингибитора ДНК-связывания 4 (ID4, Inhibitor of DNA binding 4), rs1537377 около антисмысловой РНК ингибитора 2В циклин-зависимой киназы (CDKN2B-AS1, Cyclin-dependent kinase inhibitor 2B antisense RNA) и rs10859871 рядом с vezatin (VEZT). Два других (rs1250248 и rs4141819) показали отчетливую пограничную взаимосвязь с наиболее тяжелыми стадиями заболевания (III-IV стадия) [5, 6]: rs1250248 в фибронектине 1 (FN1, fibronectin1) и rs4141819 на 2p14.

Другие исследования [5, 6, 11] подтвердили статистически значимую взаимосвязь развития эндометриоза и rs10859871, расположенного близко к гену VEZT, в сравнении с общей популяцией с лапароскопически подтвержденным контролем. Подобные достоверные данные по взаимосвязи эндометриоза и rs10859871 были получены для шотландской популяции [6].

По данным других исследований, rs4703908, расположенный близко к гену ZNF366, обеспечил более высокий риск эндометриоидных кист яичников и глубокого инфильтративного эндометриоза, особенно с вовлечением кишечника [12]. Фенотипические различия между формами наружного генитального эндометриоза (эндометриоидные кисты яичников, глубокий инфильтративный эндометриоз и эндометриоз брюшины малого таза) связаны с их откликом на различные половые гормоны.

В настоящее время отсутствуют данные по частоте встречаемости наиболее характерных для эндометриоза SNPs среди женщин с различными формами наружного генитального эндометриоза (НГЭ) в российской популяции. Исследование генетических наследственных факторов, связанных с предрасположенностью к различным формам эндометриоза может помочь сократить время на диагностику, особенно в случаях тяжелых «семейных» форм данного заболевания [12].

Цель исследования: определить частоту встречаемости rs10859871 и rs4703908 среди женщин с различными формами НГЭ (эндометриоидные кисты яичников, глубокий инфильтративный эндометриоз и эндометриоз брюшины малого таза) в российской популяции.

Материал и методы исследования

В исследование включены 218 пациенток репродуктивного возраста находившихся на лечении в отделении оперативной гинекологии ФГБУ НЦАГиП им. В.И. Кулакова Минздрава России в 2015–2016 гг. Перед включением в исследование все женщины ознакомились, датировали и подписали информированное согласие в 2 экземплярах. Протокол исследования был одобрен этическим комитетом.

Всем пациенткам было проведено полное клинико-анамнестическое обследование: сбор анамнеза, общий и гинекологический осмотр, ультразвуковое исследование (УЗИ) органов малого таза, клинико-лабораторное обследование. Эндоскопическую операцию проводили по стандартизированной методике с помощью эндовидеохирургического оборудования фирмы Karl Storz (Германия). Во время операции осматривали органы брюшной полости и малого таза, при обнаружении эндометриоидных кист яичников и/или эндометриоидных очагов оценивали степень распространенности эндометриоза. Стадирование эндометриоза во время лапароскопического оперативного вмешательства производили по пересмотренной в 1996 г. классификации Американского общества репродуктивной медицины (ASRM).

Критерии включения в исследование: женщины в репродуктивном возрасте (18–45 лет); женщины, у которых при лапароскопическом оперативном вмешательстве выявлен НГЭ (эндометриоидные кисты яичников, глубокий инфильтративный эндометриоз, эндометриоз брюшины малого таза), подтвержденный при последующем гистологическом исследовании; женщины, у которых при лапароскопическом оперативном вмешательстве не выявлен НГЭ и в анамнезе не было оперативных вмешательств по поводу НГЭ; подписанное информированное согласие на участие в исследовании.

На основании полученных данных сформированы следующие группы пациенток: 143 женщины с НГЭ (основная группа) и 75 женщин без эндометриоза (группа сравнения). В зависимости от формы НГЭ пациентки были разделены на три подгруппы: 75 женщин с эндометриоидными кистами яичников, 36 женщин с глубоким инфильтративным эндометриозом (ретроцервикальный/ректовагинальный эндометриоз) и 32 женщины с эндометриозом брюшины малого таза. Диагноз НГЭ был установлен на основании интраоперационного и гистологического исследований. Группу сравнения составили 75 женщин, у которых при выполнении лапароскопического исследования не было обнаружено эндометриоза. Это были женщины, поступившие на диагностическое лапароскопическое исследование в связи с бесплодием, а также пациентки с миомой матки, спаечным процессом, параовариальными кистами.

Материалом для исследования аллельного полиморфизма генов были образцы периферической крови пациенток с добавленным в качестве консерванта ЭДТА. Сбор образцов производился непосредственно во время операции. Образцы крови отправлялись в биобанк ФГБУ НЦАГиП им. В.И. Кулакова Минздрава России и замораживались на -70° С для последующего хранения в коллекции.

Выделение ДНК проводили комплектом реагентов «ПРОБА-РАПИД-ГЕНЕТИКА» (ООО «НПО ДНК-Технология»). Метод основан на разрушении лимфоцитов с помощью лизирующего буфера, не влияющего на целостность мембран ядер лимфоцитов. Амплификацию ДНК проводили на приборе ДТпрайм (ООО «ДНК-Технология», Россия). ПЦР-реакция проводилась с праймерами на участки генома rs10859871 и rs4703908:

rs10859871: 5’- ATACAAAAGTCAGCCAGCCAGCC – 3’

5’- CCTGGAACAATGGTGTAACT – 3’

rs4703908: 5’- GGACTGGGGTAGTGCTCCTCAGAA – 3’

5’-GAATGAGCATTTGCATGGAGAGTCA- 3’

Последовательности фрагментов были определены путем секвенирования методом Сенгера на приборе ABI PRISM 3130 (Applied BioSystems, США). Генотипирование аллельных состояний каждого однонуклеотидного полиморфизма проводилось визуально по хроматограммам с помощью программы BioEdit.

Данные по европейской популяции получены по опубликованным результатам Проекта «1000 геномов». Официальные данные данного проекта представлены на сайте: http://www.ensembl.org/index.html.

Статистический анализ полученных данных проводили с применением стандартных методов математико-статистической обработки с использованием пакетов программ прикладного статистического анализа (Statistica for Windows v. 10.0, Office 2003, Microsoft Excel и др.). Для оценки межгрупповых различий значений признаков применяли критерий χ2 Пирсона, t-критерий Стьюдента. Для всех критериев и тестов величину критического уровня значимости принимали равной 0,05, то есть различия признавали статистически значимыми при p<0,05. Оценку соответствия выявленных частот генотипов закону Харди–Вайнберга проводили по критерию χ2 в сравнении с ожидаемыми частотами генотипов равновесного распределения.

Для оценки ассоциаций рассчитывали отношение шансов (OR) по формуле: OR=ad/bc (формула 2), где а – число лиц с наличием анализируемого маркера среди больных; b – его отсутствие среди больных; c и d – число лиц соответственно с наличием и отсутствием маркера в контрольной группе. Величина ОR=1 указывает на отсутствие ассоциации, ОR> 1 – имеет место при положительной ассоциации (фактор риска) и ОR<1 – отрицательная ассоциация аллеля (или генотипа) с заболеванием (протективный фактор). Отношение шансов (OR) приведено с 95% доверительным интервалом (CI). Мы считаем, так же как и другие исследователи [12, 13], что при OR<1,5 ассоциация не достаточно сильна, чтобы рассматривать потенциальное клиническое применение.

Результаты исследования

Обследованы 143 пациентки с различными формами НГЭ в возрасте от 18 до 45 лет. Во время оперативного вмешательства у 52,4% пациенток выявлены эндометриоидные кисты яичников, у 25,2% пациенток выявлен глубокий инфильтративный эндометриоз (ретроцервикальный /ректовагинальный эндометриоз) и у 22,4% – эндометриоз брюшины малого таза. Клиническая характеристика пациенток представлена в табл. 1.

Таким образом, возраст пациенток и характеристики менструального цикла в основной группе и группе сравнения достоверно не различались (p<0,05).

Частота встречаемости SNPs (rs10859871 и rs4703908) среди женщин с различными формами НГЭ в российской популяции

Распределение генотипов для всех полиморфизмов группы сравнения соответствовало ожидаемым частотам генотипов равновесного распределения по закону Харди–Вайнберга. Полученные данные о частотах встречаемости аллелей однонуклеотидных полиморфизмов в генах, способствующих развитию различных форм НГЭ, в группах исследования представлены в табл. 2. Помимо этого в таблице представлены данные о частотах аллелей и генотипов в европейской популяции. Полученные нами данные по частотам аллелей и генотипов в группе сравнения соответствуют данным по Европе.

Частоты встречаемости аллелей и генотипов при различных формах НГЭ сопоставлены с частотами встречаемости в группах сравнения. Выявлена положительная ассоциация гетерозиготного генотипа C/G локуса rs4703908 и риска развития эндометриоидных кист яичников (OR=1,78; 95%CI: 0,88–3,62; p>0,05) и глубокого инфильтративного эндометриоза (OR=2,02; 95% CI: 0,85–4,73; p>0,05). Выявлена положительная ассоциация C/G локуса rs4703908 и риска развития эндометриоза брюшины малого таза (OR=1,24; 95% CI: 0,49–3,16; p>0,05), однако OR не превышало 1,5. Выявлена положительная ассоциация гомозиготного генотипа GG локуса rs4703908 и риска развития эндометриоза брюшины малого таза (OR=3,29; 95% CI: 0,82–13,16; р>0,05) по сравнению с условно здоровыми женщинами основной группы сравнения. Достоверное увеличение частоты встречаемости выявлено только для гомозиготного генотипа GG локуса rs4703908 при сравнении с европеоидами (OR=3,3; 95% CI: 1,2–9,1; р<0,05).

Выявлена положительная ассоциация гомозиготного генотипа СС локуса rs10859871 и риска развития эндометриоидных кист яичников (OR=5,61; 95% CI: 1,8–17,49; р<0,01), глубокого инфильтративного эндометриоза (OR=5,92; 95% CI: 1,68–20,83; p<0,01) и эндометриоза брюшины малого таза (OR=4,44; 95% CI: 1,15–17,07; p<0,05) по сравнению с условно здоровыми женщинами основной группы сравнения. В группах женщин с НГЭ достоверно чаще выявлялся гомозиготный генотип СС локуса rs10859871 при сравнении с европеоидами: эндометриоидные кисты яичников (OR=3,29; 95% CI: 1,78–6,09; p<0,01), глубокий инфильтративный эндометриоз (OR=3,5; 95% CI: 1,5–7,9; р<0,01), эндометриоз брюшины малого таза (OR=2,6; 95% CI: 1–6,7; р<0,05). Отмечается отрицательная ассоциация гомозиготного генотипа АА локуса rs10859871 и риска развития эндометриоидных кист яичников (OR=0,77; 95% CI: 0,40–1,45; p>0,05), глубокого инфильтративного эндометриоза (OR=0,44; 95% CI: 0,19–1,00; p<0,05), эндометриоза брюшины малого таза (OR=0,58; 95% CI: 0,25–1,38; p<0,05).

В группе женщин с НГЭ достоверно чаще отмечен гомозиготный генотип СC локуса rs10859871 по сравнению с условно здоровыми женщинами из группы сравнения и европеоидами (аутосомно-рецессивная модель наследования).

Обсуждение

Полученные нами данные о частотах встречаемости аллелей однонуклеотидных полиморфизмов в генах, ассоциированных с развитием эндометриоза, в группе сравнения соответствуют данным по Европе (р<0,05). Некоторые недостоверные расхождения могут быть связаны со спецификой смешанной российской популяции и спецификой выборки европейской популяции (наличие данных, в том числе по мужчинам и отсутствие строгого отбора по признаку отсутствия НГЭ в европейской популяции). Косвенным показателем достоверности получаемых результатов может служить соответствие распределения частот генотипов полиморфизмов ожидаемым частотам генотипов равновесного распределения по закону Харди–Вайнберга, которое подтверждено в нашем исследовании. Данные по европейской популяции получены по опубликованным результатам Проекта «1000 геномов». Цель данного проекта состояла в обнаружении, генотипировании и обеспечении точной информации по гаплотипам полиморфизмов генома человека в различных популяциях: Европа, Восточная Азия, Южная Азия, Западная Африка и Америка. Официальные данные по реализации данного проекта представлены на сайте: http://www.ensembl.org/index.html.

В проведенном нами исследовании установлено, что гетерозиготный генотип C/G локуса rs4703908 связан с более высоким риском развития эндометриоидных кист яичников (OR=1,78; 95% CI: 0,88–3,62; p>0,05) и глубокого инфильтративного эндометриоза (OR=2,02; 95% CI: 0,85–4,73; p>0,05) в российской популяции. Гетерозиготный генотип C/G локуса rs4703908 связан с более высоким риском развития эндометриоза брюшины малого таза (OR=1,24; 95% CI: 0,49–3,16; p>0,05) по сравнению с группой условно здоровых женщин из контрольной группы. Однако в этом случае OR<1,5, поэтому мы считаем, что ассоциация не достаточно сильна, чтобы предполагать здесь причинно-следственную связь и/или рассматривать потенциальное клиническое применение. Результаты нашего исследования совпадают с данными зарубежных авторов [12], согласно которым rs4703908, расположенный вблизи ZNF366 гена, обеспечивал более высокий риск развития эндометриоидных кист яичников (OR=2,22; 95% CI: 1,26–3,92) и глубокого эндометриоза, особенно с вовлечением кишечника (OR=2,09; 95% CI: 1,12–3,91).

Фенотипические различия между формами наружного генитального эндометриоза (эндометриоидные кисты яичников, глубокий инфильтративный эндометриоз и эндометриоз брюшины малого таза) связаны с их откликом на различные половые гормоны. Эндометриоидные кисты яичников, глубокий инфильтративный эндометриоз и эндометриоз брюшины малого таза по-разному реагируют на прогестерон [14–18], изменения экспрессии некоторых генов [12, 14–16] и различные предрасполагающие факторы, которые могут влиять на одну форму заболевания и не влиять на другие [17, 19]. Rs4703908 связан с заменой G на C и расположен на хромосоме 5 в интронной области вблизи ZNF366 (zinc finger protein 366). ZNF366 играет важную роль в регуляции экспрессии таргетных генов, отвечающих на эстрогены [20]. ZNF366 может быть независимым прогностическим фактором рака груди [12, 21, 22]. ZNF366 также может действовать как опухолевый супрессор при развитии рака молочной железы [12, 23]. Результаты нашего исследования согласуются с данными зарубежных авторов [12] и делают rs4703908 вероятным кандидатным геном для эндометриоза (особенно эндометриоидных кист яичников и глубокого инфильтративного эндометриоза), который является эстроген-зависимым заболеванием. Можно предположить, что эндометриоидные кисты яичников и глубокий инфильтративный эндометриоз являются более эстроген-зависимыми формами заболевания по сравнению с эндометриозом брюшины малого таза, в развитии которого, вероятно, более значительную роль играют другие патогенетические факторы.

В проведенном нами исследовании установлено, что гомозиготный генотип СС локуса rs10859871, расположенный вблизи vezatin (VEZT) гена, обеспечивает более высокий риск развития всех форм НГЭ в российской популяции. Гомозиготный генотип СС локуса rs10859871 обеспечивает более высокий риск развития эндометриоидных кист яичников (OR=5,61; 95% CI: 1,8–17,49; р<0,01), глубокого инфильтративного эндометриоза (OR=5,92; 95% CI: 1,68–20,83; p<0,01) и эндометриоза брюшины малого таза (OR=4,44; 95% CI: 1,15–17,07; p<0,05). Мы нашли достоверное увеличение частоты встречаемости гомозиготного СС генотипа rs10859871 по сравнению с европеоидами: эндометриоидные кисты яичников (OR=3,29; 95% CI: 1,78-6,09; p<0,01), глубокий инфильтративный эндометриоз (OR=3,5; 95% CI: 1,5–7,9; р<0,01), эндометриоз брюшины малого таза (OR=2,6; 95% CI: 1–6,7; р<0,05). Значения OR для rs10859871 выше 1,5, это значит, что ассоциация достаточно сильна и можно предполагать причинно-следственные отношения и/или рассматривать потенциальное клиническое применение. В нашем исследовании гомозиготный генотип АА локуса rs10859871 выполняет протективную роль и снижает риск развития эндометриоидных кист яичников (OR=0,77; 95% CI: 0,40–1,45; p>0,05), глубокого инфильтративного эндометриоза (OR=0,44; 95% CI: 0,19–1,00; p<0,05), эндометриоза брюшины малого таза (OR=0,58; 95% CI: 0,25–1,38; p<0,05).

Наши результаты совпадают с данными GWAS-исследований [6, 24], согласно которым был идентифицирован локус в 12q22 около VEZT – rs10859871, ассоциированный с развитием эндометриоза. По данным метаанализа и повторного GWAS-исследования было найдено 9 локусов связанных с развитием заболевания, из которых шесть (rs7521902, rs1270667, rs13394619, rs7739264, rs1537377 и rs10859871), в том числе rs10859871, определялись при эндометриозе наиболее часто [6].

Наши данные соответствуют результатам ряда других зарубежных исследований [6, 11], согласно которым найдена статистически значимая взаимосвязь развития эндометриоза с rs10859871 в сравнении с общей популяцией (OR=1,43; 95% CI: 1,20–1,71; р=6,9×10(-5)) и лапароскопически подтвержденным контролем (OR=1,58; 95% CI: 1,24–2,02; р=2,1×10(-4)).

Локус VEZT кодирует трансмембранный белок VEZT, который был идентифицирован как компонент Е-кадгерин-катенинового комплекса адгезивных соединений [6]. Белок показал важную роль в генерации адгезивных сил, необходимых для изменений клеточной формы и/или движений во время эмбриогенеза [6, 25]. Предположительно, отсутствие VEZT приводит к нестабильному взаимодействию между E-кадгерин-катениновым комплексом и актиновым цитоскелетом в адгезивном соединении. Либо VEZT может входить в ядро клетки, регулируя экспрессию таргетных генов, которые модулируют клеточную адгезию или инвазию [25]. Позже было установлено, что VEZT действует как предполагаемый ген-супрессор опухолевого роста, поражая клеточную миграцию и инвазию [26]. Экспрессия определенных молекул адгезии, таких как интегрины и кадгерины, наблюдалась в эутопическом и эктопическом эндометрии от женщин с эндометриозом [6]. Миграция-адгезия-инвазия – фундаментальные патологические процессы эндометриоза. Эндометриальные клетки, которые при ретроградной менструации попадают в брюшную полость, для выживания в условиях гипоксии должны непрерывно экспрессировать молекулы, вовлеченные в процессы миграции, адгезии и инвазии, приводя к развитию эндометриоидных очагов [14, 15]. В microarray-исследовании обнаружили повышение экспрессии 2255 и снижение экспрессии 408 генов в эктопических эндометриоидных очагах по сравнению с эутопическим эндометрием от женщин с эндометриозом [15, 16, 27]. Эти гены (differentially expressed genes – DEGs) были преимущественно связаны с фокальной адгезией (например, FN1, EGF, FYN, EGFR, RAC1, CCND1 и JUN), регулированием актинового цитоскелета (например, FN1, EGF, EGFR, RAC1 и JUN) и MAPK-сигнальным путем (например, EGF, EGFR, RAC1, JUN, TGFB1 и MYC) [14–16, 27]. В других microarray-исследованиях эутопического эндометрия от женщин с эндометриозом по сравнению с эутопическим эндометрием от женщин без эндометриоза также были выявлены различно экспрессирующиеся гены [14–16, 28, 29]. Путь фокальной адгезии и рибосомальный путь были дисрегулированы при эндометриозе и лежали в основе патогенеза этого заболевания [14–16, 27–29]. Продемонстрировано, что динамика актинового цитослелета, затрагивающая клеточную миграцию, была различно отрегулирована стероидными гормонами у пациентов с эндометриозом и без этого заболевания [30]. Поэтому не удивительно, что ген, отвечающий за адгезивные межклеточные соединения и актиновую динамику, связан с эндометриозом.

Заключение

Гетерозиготный генотип C/G локуса rs4703908, расположенный вблизи ZNF366 гена, связан с повышенным риском развития эндометриоидных кист яичников и глубокого инфильтративного эндометриоза в российской популяции. Гомозиготный генотип СС локуса rs10859871, расположенный вблизи VEZT гена, обеспечивает значительно более высокий риск развития всех форм НГЭ (эндометриоидные кисты яичников, глубокий инфильтративный эндометриоз, эндометриоз брюшины малого таза) в российской популяции (аутосомно-рецессивная модель наследования). Гомозиготный генотип АА локуса rs10859871 выполняет протективную роль и снижает риск развития эндометриоидных кист яичников, глубокого инфильтративного эндометриоза, эндометриоза брюшины малого таза. Результаты нашего исследования делают rs10859871 вероятным кандидатным маркером, тестирование по которому может выявлять повышенную вероятность развития НГЭ у женщин российской популяции.

Список литературы

1. Эндометриоз: диагностика, лечение и реабилитация. Федеральные клинические рекомендации по ведению больных. М.; 2013.

2. Адамян Л.В., Спицын В.А., Андреева Е.Н. Генетические аспекты гинекологических заболеваний. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2008. 215с.

3. Адамян Л.В. Эндометриозы. Руководство для врачей. M.: Медицина; 1998. 320с.

4. Sourial S., Tempest N., Hapangama D.K. Theories on the pathogenesis of endometriosis. Int. J. Reprod. Med. 2014; 2014: 179515. doi: 10.1155/2014/179515.

5. Rahmioglu N., Nyholt D.R., Morris A.P., Missmer S.A., Montgomery G.W., Zondervan K.T. Genetic variants underlying risk of endometriosis: insights from meta-analysis of eight genome-wide association and replication datasets. Hum. Reprod. Update. 2014; 20(5): 702-16. doi: 10.1093/humupd/dmu015.

6. Pagliardini L., Gentilini D., Sanchez A.M., Candiani M., Viganò P., Di Blasio A.M. Replication and meta-analysis of previous genome-wide association studies confirm vezatin as the locus with the strongest evidence for association with endometriosis. Hum. Reprod. 2015; 30(4): 987-93. doi: 10.1093/humrep/dev022.

7. Adachi S., Tajima A., Quan J., Haino K., Yoshihara K., Masuzaki H. et al. Meta-analysis of genome-wide association scans for genetic susceptibility to endometriosis in Japanese population. J. Hum. Genet. 2010; 55(12): 816-21. doi: 10.1038/jhg.2010.118.

8. Uno S., Zembutsu H., Hirasawa A., Takahashi A., Kubo M., Akahane T. et al. A genome-wide association study identifies genetic variants in the CDKN2BAS locus associated with endometriosis in Japanese. Nat. Genet. 2010; 42(8): 707-10. doi: 10.1038/ng.612.

9. Painter J.N., Anderson C.A., Nyholt D.R., Macgregor S., Lin J., Lee S.H. et al. Genome-wide association study identifies a locus at 7p15.2 associated with endometriosis. Nat. Genet. 2011; 43(1): 51-4. doi: 10.1038/ng.731.

10. Albertsen H.M., Chettier R., Farrington P., Ward K. Genome-wide association study link novel loci to endometriosis. PLoS One. 2013; 8(3): e58257. doi: 10.1371/journal.pone.0058257.

11. Sapkota Y., Fassbender A., Bowdler L., Fung J.N., Peterse D. et al. Independent replication and meta-analysis for endometriosis risk loci. Twin Res. Hum. Genet. 2015; 18(5): 518-25. doi: 10.1017/thg.2015.61.

12. Borghese B., Tost J., de Surville M., Busato F., Letourneur F., Mondon F. et al. Identification of susceptibility genes for peritoneal, ovarian, and deep infiltrating endometriosis using a pooled sample-based genome-wide association study. Biomed. Res. Int. 2015; 2015: 461024. doi: 10.1155/2015/461024.

13. Rahmioglu N., Missmer S.A., Montgomery G.W., Zondervan K.T. Insights into assessing the genetics of endometriosis. Curr. Obstet. Gynecol. Rep. 2012; 1(3): 124-37.

14. Тихончук Е.Ю., Асатурова А.В., Адамян Л.В. Молекулярно-биологические изменения эндометрия у женщин с наружным генитальным эндометриозом. Акушерство и гинекология. 2016; 11: 42-8. http://dx.doi.org/10.18565/aig.2016.11.42-8

15. Тихончук Е.Ю., Непша О.С., Адамян Л.В., Кузнецова М.В. Омиксные технологии в исследовании патогенеза эндометриоза. Проблемы репродукции. 2016; 22(5): 110-22.

16. Тихончук Е.Ю., Асатурова А.В., Адамян Л.В. Частота выявления и структура патологических изменений эндометрия у женщин репродуктивного возраста с генитальным эндометриозом. Акушерство и гинекология. 2016; 12: 87-95. http://dx.doi.org/10.18565/aig.2016.12.87-95

17. Зайратьянц О.В., Адамян Л.В., Андреева Е.Н., Максимова Ю.В., Мурдалова З.Х., Опаленов К.В., Мовтаева Х.Р., Сонова М.М. Молекулярно-биологические особенности эктопического и эутопического эндометрия при генитальном эндометриозе. Архив патологии. 2010; 72(5): 6-12.

18. Зайратьянц О.В., Адамян Л.В., Сомова М.М., Борзенкова И.П., Опаленов К.В., Барсанова Т.Г., Мовтаева X.Р. Экспрессия ароматазы цитохрома Р-450 в эктопическом и эутопическом эндометрии при эндометриозе. Архив патологии. 2008; 70(5): 16-20.

19. Kang S., Li S.Z., Wang N., Zhou R.M., Wang T., Wang D.J. et al. Association between genetic polymorphisms in fibroblast growth factor (FGF)1 and FGF2 and risk of endometriosis and adenomyosis in Chinese women. Hum. Reprod. 2010; 25(7): 1806-11. doi: 10.1093/humrep/deq128.

20. Lopez-Garcia J., Periyasamy M., Thomas R.S., Christian M., Leao M., Jat P. et al. ZNF366 is an estrogen receptor corepressor that acts through CtBP and histone deacetylases. Nucleic Acids Res. 2006; 34(21): 6126-36.

21. Sieuwerts A.M., Ansems M., Look M.P., Span P.N., de Weerd V., van Galen A. et al. Clinical significance of the nuclear receptor co-regulator DC-SCRIPT in breast cancer: an independent retrospective validation study. Breast Cancer Res. 2010; 12(6): R103. doi: 10.1186/bcr2786.

22. Ansems M., Hontelez S., Karthaus N., Span P.N., Adema G.J. Crosstalk and DC-SCRIPT: expanding nuclear receptor modulation. Biochim. Biophys. Acta. 2010; 1806(2): 193-9. doi: 10.1016/j.bbcan.2010.05.001.

23. Ansems M., Hontelez S., Looman M.W., Karthaus N., Bult P., Bonenkamp J.J. et al. DC-SCRIPT: nuclear receptor modulation and prognostic significance in primary breast cancer. J. Natl. Cancer Inst. 2010; 102(1): 54-68. doi: 10.1093/jnci/djp441.

24. Nyholt D.R., Low S.K., Anderson C.A., Painter J.N., Uno S., Morris A.P. et al. Genome-wide association meta-analysis identifies new endometriosis risk loci. Nat. Genet. 2012; 44(12): 1355-9. doi: 10.1038/ng.2445.

25. Hyenne V., Souilhol C., Cohen-Tannoudji M., Cereghini S., Petit C., Langa F. et al. Conditional knock-out reveals that zygotic vezatin-null mouse embryos die at implantation. Mech. Dev. 2007; 124(6): 449-62.

26. Miao R., Guo X., Zhi Q., Shi Y., Li L., Mao X. et al. VEZT, a novel putative tumor suppressor, suppresses the growth and tumorigenicity of gastric cancer. PLoS One. 2013; 8(9): e74409. doi: 10.1371/journal.pone.0074409. eCollection 2013.

27. Eyster K.M., Klinkova O., Kennedy V., Hansen K.A. Whole genome deoxyribonucleic acid microarray analysis of gene expression in ectopic versus eutopic endometrium. Fertil. Steril. 2007; 88(6):1505-33.

28. Xu H.M., Deng H.T., Liu C.D., Chen Y.L., Zhang Z.Y. Phosphoproteomics analysis of endometrium in women with or without endometriosis. Chin. Med. J. (Engl). 2015; 128(19): 2617-24. doi: 10.4103/0366-6999.166022.

29. Ping S., Ma C., Liu P., Yang L., Yang X., Wu Q. et al. Molecular mechanisms underlying endometriosis pathogenesis revealed by bioinformatics analysis of microarray data. Arch. Gynecol. Obstet. 2016; 293(4): 797-804. doi: 10.1007/s00404-015-3875-y.

30. Gentilini D., Vigano P., Somigliana E., Vicentini L.M., Vignali M., Busacca M., Di Blasio A.M. Endometrial stromal cells from women with endometriosis reveal peculiar migratory behavior in response to ovarian steroids. Fertil. Steril. 2010; 93(3): 706-15. doi: 10.1016/j.fertnstert.2008.10.014.

Поступила 10.02.2017

Принята в печать 17.02.2017

Об авторах / Для корреспонденции

Пшеничнюк Екатерина Юрьевна, аспирант отделения оперативной гинекологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (917) 559-11-01. Е-mail: best-kauty@mail.ru
Кузнецова Мария Владимировна, к.б.н., с.н.с. лаборатории молекулярно-генетических методов ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-13-41. Е-mail: mkarja@mail.ru
Бурменская Ольга Владимировна, к.б.н., научный сотрудник лаборатории молекулярно-генетических методов ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова
Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-22-92. E-mail: bourmenska@mail.ru
Кочеткова Таисия Олеговна, биолог лаборатории молекулярно-генетических методов ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-22-92. E-mail: taisiya.olegovna@gmail.com
Непша Оксана Сергеевна, к.б.н., научный сотрудник лаборатории молекулярно-генетических методов ФГБУ «НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (925) 780-57-67. E-mail: nepshonok@yandex.ru
Трофимов Дмитрий Юрьевич, д.б.н., профессор, зав. лабораторией молекулярно-генетических методов ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-49-51. Е-mail: d_trofimov@oparina4.ru
Адамян Лейла Владимировна, д.м.н., профессор, академик РАН; зам. директора по науке, руководитель отделения оперативной гинекологии ФГБУ НЦАГиП
им. академика В.И. Кулакова Минздрава России; зав. кафедрой репродуктивной медицины и хирургии ФПДО, МГМСУ.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-77-83. E-mail: l_adamyan@oparina4.ru

Для цитирования: Пшеничнюк Е.Ю., Кузнецова М.В., Бурменская О.В., Кочеткова Т.О., Непша О.С., Трофимов Д.Ю., Адамян Л.В. Ассоциация между частотами встречаемости однонуклеотидных полиморфизмов в генах ZNF366 и VEZT и риском развития
наружного генитального эндометриоза: данные по российской популяции.
Акушерство и гинекология. 2017; 6: 64-72.
http://dx.doi.org/10.18565/aig.2017.6.64-72

Также по теме

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.