Роль иммунорегуляторного потенциала семенной плазмы в лечении бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения

Бабаян А.А., Николаева М.А., Смольникова В.Ю., Степанова Е.О., Донцова Т.В., Ванько Л.В., Иванец Т.Ю., Калинина Е.А., Кречетова Л.В., Сухих Г.Т.

ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, Москва
Цель исследования. Оценить зависимость эффективности программы ЭКО с применением аппликации семенной плазмы от содержания цитокинов интерлейкина (IL)-18 и трансформирующего фактора роста (TGF)-β1 в семенной плазме партнеров.
Материал и методы. В исследование были включены супружеские пары (n=71), проходившие лечение бесплодия методом ЭКО/ИКСИ с применением аппликации семенной плазмы в день трансвагинальной пункции. В зависимости от результата лечения пациентки были разделены на 2 группы: 1-я группа – пациентки с наступившей беременностью (n=32), 2-я группа – пациентки с отрицательным результатом лечения (n=39). Содержание цитокинов IL-18 и TGF-β1 в семенной плазме половых партнеров оценивали с помощью проточной цитофлуорометрии и флуоресцентных микросфер с использованием специальных наборов – Human TGF- β1 и IL-18 FlowCytomix Simplex Kits (Bender MedSystems, Vienna, Austria) Статистическая обработка данных проведена с помощью программы MedCalc 12.3.0.
Результаты. У пациенток с наступившей беременностью концентрация IL‑18 в семенной плазме и общее содержание IL-18 и TGF-β1 в эякуляте партнера были значимо ниже по сравнению с аналогичными показателями в группе женщин с неудачным исходом лечения. Соотношение TGF-β1/IL-18 было значимо выше у половых партнеров пациенток с успешным исходом лечения.
Заключение. Уровень содержания цитокинов IL-18 и TGF-β1 в семенной плазме ассоциирован с репродуктивным успехом при проведении программы ЭКО с применением аппликации семенной плазмы.

Ключевые слова

экстракорпоральное оплодотворение
семенная плазма
цитокины

В настоящее время одним из основных и наиболее эффективных методов лечения бесплодия является экстракорпоральное оплодотворение (ЭКО). Несмотря на усовершенствование эмбрионального этапа программы ЭКО, позволяющего выбрать для переноса в полость матки эмбрионы высокого качества, результативность ЭКО остается достаточно низкой [1, 2]. Очевидно, что невысокая эффективность программ ЭКО связана, в основном, не с нарушением взаимодействия гамет, а с потерями на этапе имплантации эмбриона [3].

Полноценная имплантация и последующее развитие плода обеспечиваются за счет динамического равновесия экспрессии различных генов в эндометрии под контролем не только стероидных гормонов, но и различных биологически активных молекул, в том числе и иммунных факторов [4]. Присутствие в семенной плазме (СП) широкого спектра иммуномодулирующих молекул придает ей уникальные свойства и свидетельствует о потенциальной роли СП в регуляции репродуктивной функции [5].

Успешное применение вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) свидетельствует о том, что контакт женского репродуктивного тракта с СП не является обязательным условием наступления беременности. Однако в многочисленных экспериментах продемонстрировано, что содержащиеся в СП биологически активные молекулы участвуют в формировании оптимального иммунологического фона, необходимого для успешной имплантации и обеспечения иммунной толерантности матери к отцовским антигенам [6].

Таким образом, накопленный опыт позволяет рассматривать применение СП с целью локальной физиологической стимуляции женского репродуктивного тракта в цикле ЭКО/ИКСИ как обоснованный и эффективный подход повышения эффективности лечения бесплодия [7].

Однако имеющиеся литературные данные о влиянии аппликации СП на эффективность программ ЭКО носят противоречивый характер. В то время, как некоторые исследователи не находят положительного влияния введения СП партнера [8], другие подтверждают благоприятный эффект аппликации СП на исходы циклов ВРТ [9–11].

Известно, что СП представляет собой сложную смесь цитокинов и других биологически активных молекул, следовательно, влияние СП на рецептивность эндометрия может определяться уровнем содержания различных иммуномодулирующих факторов [12, 13]. Цитокины продуцируются различными типами клеток мужского репродуктивного тракта, в частности клетками Лейдига и Сертоли, тестикулярными лейкоцитами, а также клетками предстательной железы и семенных пузырьков [14]. Основным фактором, определяющим абсолютное содержание цитокинов в СП, является длительность воздержания [14].

Одним из наиболее значимых факторов СП является трансформирующий фактор роста β1 (TGF-β1), который играет важную роль в формировании иммунной толерантности матери к антигенам плода [15]. TGF‑β синтезируется клетками добавочных мужских половых желез – простаты и семенных пузырьков [16].

В научных публикациях имеются сообщения о разнонаправленности действия некоторых цитокинов при иммунорегуляции. Одним из таких цитокинов, обладающим антагонистическим действием в отношении TGF‑β1, является присутствующий в СП интерлейкин 18 (IL‑18), провоспалительный цитокин, первоначально идентифицированный, как интерферон-γ – индуцирующий фактор [17–20]. Было установлено, что присутствие IL-18 в маточных смывах связано со снижением вероятности имплантации [21].

Недавно было высказано предположение о том, что СП может оказывать не только позитивное влияние на репродуктивную функцию женщин, но и в ряде случаев, приводить к нарушениям имплантации [22].

Таким образом, нельзя исключить, что характер влияния СП на репродуктивную функцию женщин может определяться цитокиновым профилем СП. Исследования, посвященные изучению взаимосвязи цитокинового профиля СП и исходов программы ЭКО, отсутствуют. Поэтому целью настоящего исследования явилось изучение зависимости эффективности программы ЭКО/ИКСИ с применением аппликации СП партнера от содержания цитокинов TGF‑β1 и IL‑18 в семенной плазме.

Материал и методы исследования

В исследование были включены супружеские пары, обратившиеся в отделение вспомогательных технологий в лечении бесплодия ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России (n=71). Все пациентки, соответствующие критериям включения, предоставили письменное информированное согласие.

Критериями включения пар в исследование явились: трубный фактор бесплодия, возраст пациентки не более 40 лет, нормальный овариальный резерв, не более 2 предшествующих безуспешных циклов ЭКО, нормальное анатомическое строение матки, отсутствие системных аутоиммунных заболеваний. Критериями не включения были наружный и внутренний эндометриоз III и IV стадии, миома матки больших размеров, патозооспермия III–IV степени, злокачественные новообразования любой локализации, пороки развития внутренних половых органов.

Для стимуляции функции яичников был использован стандартный протокол с рекомбинантным фолликулостимулирующим гормоном и антагонистами гонадотропин-рилизинг-гормона (ГнРГ). При проведении стандартной программы ЭКО всем пациенткам в день трансвагинальной пункции яичников вводили СП супруга в объёме 0,5 мл в задний свод влагалища. С целью получения СП часть эякулята супруга, полученного в день трансвагинальной пункции яичников, подвергали центрифугированию при оборотах 18 000g в течение 10 минут. Супернатант в объеме 0,5 мл вводили в задний свод влагалища сразу после забора ооцитов, оставшуюся часть СП замораживали. Беременность определялась как возрастание уровня β-субъединицы хорионического гонадотропина в сыворотке крови более 100 МЕ/л на 14-й день после переноса эмбриона с последующей визуализацией плодного яйца при вагинальном ультразвуковом исследовании на 21-й день после переноса эмбриона.

Концентрацию цитокинов TGF-β1 и IL-18 в СП оценивали с помощью проточной цитофлуорометрии и флуоресцентных микросфер, используя коммерческие наборы Human TGF- β1 FlowCytomix Simplex Kit и Human IL-18 FlowCytomix Simplex Kit (Bender MedSystems, Австрия) и проточный цитофлуориметр FACSCalibur (Becton Dickinson, США). Концентрации TGF‑β1 (сумма свободного и латентного TGF-β1, нг/мл) и IL-18 (пг/мл) в каждом образце были вычислены с помощью специального программного обеспечения FlowCytomix Pro 3.0 Software, (Bender MedSystems, Austria).

Были определены следующие показатели: концентрация цитокинов TGF-β1 и IL-18, общее содержание TGF-β1 и IL-18 в эякуляте (концентрация TGF-β1 и IL-18 × объем эякулята) и соотношение концентраций TGF-β1/IL-18 (TGF-β1/IL-18 коэффициент).

Статистическая обработка результатов проводилась с использованием пакета прикладных программ Microsoft и MedCalc. При характеристике выборок, удовлетворяющих критериям нормального распределения, использовали среднее значение и стандартное отклонение. Для выборок, не удовлетворяющих критериям нормального распределения, использовали значение медианы и указывали максимальное и минимальное значение соответствующих показателей. Для определения достоверности различия значений в двух независимых выборках использовали непараметрический критерий Манна–Уитни.

Результаты исследования

В результате лечения бесплодия методом ЭКО с использованием аппликации СП в репродуктивный тракт женщины беременность наступила у 45,1% пациенток. В соответствии с результатами лечения бесплодия были сформированы две группы: 1-я группа – пациентки с успешным исходом лечения (n=32), 2-я группа – пациентки с отрицательным результатом лечения (n=39).

При оценке клинико-анамнестических данных, параметров фолликулогенеза, оогенеза и раннего эмбриогенеза у пациенток исследуемых групп статистически значимых отличий выявлено не было, группы были однородны и сопоставимы по анализируемым параметрам (таблица). Статистически значимых различий по основным параметрам спермограммы половых партнеров пациенток не выявлено.

Установлено, что концентрация TGF-β1 в СП партнеров пациенток с успешным и неуспешным исходами программы ЭКО не различалась (р=0,796, рис. 1А). Концентрация IL-18 в СП половых партнеров у пациенток с наступившей беременностью была значимо ниже по сравнению с аналогичными показателями в группе женщин с неуспешным исходом лечения и составила 313,6±131,8 и 387,5±1215,0 пг/мл соответственно (р=0,018, рис. 1Б). В то же время, соотношение TGF-β1/IL-18 в группе пациенток с успешным исходом лечения было значимо выше по сравнению с аналогичным показателем в группе женщин с неудачной попыткой ЭКО и составило 470±228 и 363±146 соответственно (р=0,02, рис. 1Д).

При оценке уровня цитокинов TGF-β1 и IL-18 во всем объеме СП, полученном при эякуляции, было установлено, что содержание как IL-18, так и TGF-β1 у партнеров пациенток с успешным исходом лечения было значимо ниже по сравнению с аналогичным показателем у партнеров женщин с отрицательным результатом лечения (р=0,0001; р=0,04 соответственно, рис. 1В,Г).

Была выявлена значимая положительная корреляционная связь между общим содержанием TGF-β1 и IL-18 в эякуляте половых партнеров пациенток с наступившей беременностью (r=0,448; p=0,010) и женщин с неудачным исходом лечения (r=0,679; p<0,0001).

Для оценки клинической значимости определения уровня исследованных цитокинов в СП полового партнера с целью прогнозирования исходов программы ЭКО/ИКСИ, был проведен анализ полученных результатов с помощью построения характеристических кривых (Receiver Operating Characteristics – ROC) (рис. 2).

Согласно полученным данным, содержание IL-18, концентрация IL-18, соотношение TGF-β1/IL-18 и содержание TGF-β1 в эякуляте являются значимыми предикторами успеха исходов лечения бесплодия методом ЭКО/ИКСИ.

Наиболее значимым прогностическим критерием исхода лечения бесплодия методом ЭКО с применением аппликации СП явилось содержание IL-18 во всем объеме СП. Площадь под характеристической кривой составила 0,749, чувствительность и специфичность теста составили 0,94 и 0,51 соответственно. У пациенток, эякулят партнеров которых содержал относительно низкое количество IL-18 (<1432,4 пг), вероятность наступления беременности была в 6,7 раза выше по сравнению с пациентками, в СП половых партнеров которых отмечался относительно высокий уровень IL-18 (>1432,4 пг) и составляла 61,2 и 9,1% соответственно.

Обсуждение

В представленной работе впервые показана ассоциация между уровнем цитокинов в СП половых партнеров и репродуктивным успехом у пациенток, проходивших лечение методом ЭКО/ИКСИ с применением аппликации СП в день трансвагинальной пункции яичников. У пациенток с успешным исходом лечения концентрация IL-18 в СП партнера была значимо ниже по сравнению с аналогичным показателем половых партнеров женщин, у которых беременность не наступила. Таким образом, высокий уровень IL-18 ассоциирован с неблагоприятным исходом лечения. Эти данные согласуются с результатами предыдущих исследований, которые продемонстрировали, что, несмотря на важную роль IL-18 в процессе ангиогенеза в эндометрии, необходимого для успешной имплантации, повышенный уровень данного цитокина в смывах из полости матки может стать причиной нарушения процесса имплантации [21].

Раннее было показано, что повышенный уровень IL-18 в сперме связан с урогенитальной инфекцией и патозооспермией [19, 20]. Известно, что лейкоцитоспермия является неспецифическим лабораторным маркером латентного воспалительного процесса в мужском урогенитальном тракте. Однако в данном исследовании статистически значимых различий между основными параметрами спермы в исследуемых группах выявлено не было, при этом лейкоцитоспермия являлась критерием исключения. Кроме того, концентрации IL-18 в СП половых партнеров пациенток с успешным исходом лечения и женщин с неудачной попыткой ЭКО, совпадали с аналогичными показателями в СП фертильных мужчин, приведенных в ряде предыдущих исследований [19, 20].

Следовательно, маловероятно, что повышенный уровень IL-18 в СП партнеров в группе женщин с отрицательным результатом лечения отражал наличие скрытой урогенитальной инфекции у половых партнеров пациенток.

Концентрации TGF-β1 в СП партнеров пациенток с успешным и неудачным исходами программ ЭКО не различались. На первый взгляд, результаты представленной работы противоречат современным представлениям о ведущей роли TGF-β1 в СП, как фактора, обеспечивающего эффективность имплантации. Полученные данные о высоких значениях соотношения TGF-β1/IL-18 у пациенток с успешным исходом лечения по сравнению с аналогичным показателем в группе женщин с неудачной попыткой ЭКО свидетельствуют о значимости TGF-β1 в репродуктивном процессе. Однако, влияние данного цитокина на исходы программы ЭКО/ИКСИ зависит от присутствия IL-18 и реализуется в том случае, если концентрация TGF-β1 существенно (более чем в 454 раза, согласно данным ROC анализа) превышает концентрацию IL-18.

В представленной работе продемонстрировано, что эффективность репродуктивных технологий зависит от общего уровня цитокинов во всем объёме эякулята. Ранее было показано, что половая жизнь в перитрансферный период при проведении программы ЭКО благоприятно влияет на результаты лечения [23]. Возможно, что воздействие СП на исходы программы ЭКО может реализовываться не только при применении аппликации СП в день трансвагинальной пункции яичников, но и при поступлении СП в репродуктивный тракт женщины при предшествующих сексуальных отношениях с биологическим отцом в цикле ЭКО.

Среди различных механизмов, которые могли бы объяснить доставку компонентов СП к эндометрию после полового контакта или аппликации СП, ключевую роль, вероятно, играет система противоточного обмена между венами влагалища и артериями матки [24]. Возможно, именно этот способ доставки цитокинов СП в верхние отделы репродуктивного тракта предполагает абсорбцию данных молекул во влагалище и, благодаря обмену между венозными сосудами влагалища и артериальными сосудами матки, передачу цитокинов, в частности, IL-18 и TGF-β1, интенсивность которой пропорциональна общему содержанию этих цитокинов в эякуляте.

В представленной работе продемонстрировано, что количественное определение цитокинов СП, поступающей в женские половые пути, имеет клиническое значение для прогнозирования вероятности наступления беременности.

Заключение

Таким образом, эффективность реализации репродуктивной функции женщин в программе ЭКО с применением аппликации СП в день трансвагинальной пункции яичников зависит от индивидуальных иммуномодулирующих свойств СП полового партнера. Выявленные взаимосвязи между исходами программы ЭКО с применением аппликации СП и иммуномодулирующими свойствами СП половых партнеров пациенток свидетельствуют о целесообразности персонифицированного назначения аппликации СП партнера в программе ЭКО/ИКСИ.

Изучение роли иммунных факторов СП при имплантации и дальнейшем развитии беременности может явиться основой для разработки новых терапевтических методов повышения эффективности лечения бесплодия методом ЭКО.

Список литературы

1. Корсак В.С., Смирнова А.А., Шурыгина О.В. ВРТ в России. Отчет за 2013 год. Регистр ВРТ. СПб.: Российская Ассоциация Репродукции Человека; 2015: 26-9.

2. Kupka M.S., Ferraretti A.P., de Mouzon J., Erb K., D’Hooghe T., Castilla J.A. et al.; European IVF-Monitoring Consortium, for the European Society of Human Reproduction and Embryology. Assisted reproductive technology in Europe 2010: results generated from European registers by ESHRE. Hum. Reprod. 2014; 29(10): 2099-113.

3. Edwards R.G. Human implantation: the last barrier in assisted reproduction technologies? Reprod. Biomed. Online. 2006; 13(6): 887-904.

4. Boomsma C.M., Kavelaars A., Eijkemans M.J., Lentjes E.G., Fauser B.C., Heijnen C.J., Macklon N.S. Endometrial secretion analysis identifies a cytokine profile predictive of pregnancy in IVF. Hum. Reprod. 2009; 24(6): 1427-35.

5. Robertson S.A., Sharkey D.J. Seminal fluid and fertility in women. Fertil. Steril. 2016; 106(3): 511-9.

6. Robertson S.A., Prins J.R., Sharkey D.J., Moldenhauer L.M. Seminal fluid and the generation of regulatory T cells for embryo implantation. Am. J. Reprod. Immunol. 2013; 69(4): 315-30.

7. Crawford G., Ray A., Gudi A., Shah A., Homburg R. The role of seminal plasma for improved outcomes during in vitro fertilization treatment: review of the literature and meta-analysis. Hum. Reprod. Update. 2015; 21(2): 275-84.

8. von Wolff M., Rösner S., Germeyer A., Jauckus J., Griesinger G., Strowitzki T. Intrauterine instillation of diluted seminal plasma at oocyte pick-up does not increase the IVF pregnancy rate: a double-blind, placebo controlled, randomized study. Hum. Reprod. 2013; 28(12): 3247-52.

9. Bellinge B.S., Copeland C.M., Thomas T.D., Mazzucchelli R.E., O’Neil G., Cohen M.J. The influence of patient insemination on the implantation rate in an in vitro fertilization and embryo transfer program. Fertil. Steril. 1986; 46(2): 252-6.

10. Chicea R., Ispasoiu F., Focsa M. Seminal plasma insemination during ovum-pickup-a method to increase pregnancy rate in IVF/ICSI procedure Apilot randomized trial. J. Assist. Reprod. Genet. 2013; 30(4): 569-74.

11. Coulam C.B., Stern J.J. Effect of seminal plasma on implantation rates. Early Pregnancy. 1995; 1(1): 33-6.

12. Politch J.A., Tucker L., Bowman F.P., Anderson D.J. Concentrations and significance of cytokines and other immunologic factors in semen of healthy fertile men. Hum. Reprod. 2007; 22(11): 2928-35.

13. Schjenken J.E., Robertson S.A. Seminal fluid signaling in the female reproductive tract: implications for reproductive success and offspring health. Adv. Exp. Med. Biol. 2015; 868: 127-58.

14. Sharkey D.J., Tremellen K.P., Briggs N.E., Dekker G.A., Robertson S.A. Seminal plasma transforming growth factor-β, activin A and follistatin fluctuate within men over time. Hum. Reprod. 2016; 31(10): 2183-91.

15. Sharkey D.J., Macpherson A.M., Tremellen K.P., Mottershead D.G., Gilchrist R.B., Robertson S.A. TGF-β mediates pro-inflammatory seminal fluid signaling in human cervical epithelial cells. J. Immunol. 2012; 189(2): 1024-35.

16. Keogan S., Siegert K., Wigdahl B., Krebs F.C. Variability in human semen content and its potential effects in the female reproductive tract. J. Reprod. Biol. Health. 2016; 4(1): 1-8.

17. ?outoulaki A., Langley M., Sloan A.J., Aeschlimann D., Wei X.Q. TNF-alphaand TGF-beta1 influence IL-18-induced IFN-gamma production through regulation of IL-18 receptor and T-bet expression. Cytokine. 2010; 49(2):177-84.

18. Massagué J. How cells read TGF-beta signals. Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. 2000; 1(3): 169-78.

19. Matalliotakis I.M., Cakmak H., Fragouli Y., Kourtis A., Arici A., Huszar G. Increased IL-18 levels in seminal plasma of infertile men with genital tract infections. Am. J. Reprod. Immunol. 2006; 55(6): 428-33.

20. Qian L., Zhou Y., Du C., Wen J., Teng S., Teng Z. IL-18 levels in the semen of male infertility: semen analysis. Int. J. Biol. Macromol. 2014; 64: 190-2.

21. Lédée-Bataille N., Olivennes F., Kadoch J., Dubanchet S., Frydman N., Chaouat G., Frydman R. Detectable levels of interleukin-18 in uterine luminal secretions at oocyte retrieval predict failure of the embryo transfer. Hum. Reprod. 2004; 19(9): 968-73.

22. Anderson D.J., Politch J.A. Role of seminal plasma in human female reproductive failure: immunomodulation, inflammation, and infections. Adv. Exp. Med. Biol. 2015; 868: 159-69.

23. Tremellen K.P., Valbuena D., Landeras J., Ballesteros A., Martinez J., Mendoza S. et al. The effect of intercourse on pregnancy rates during assisted human reproduction. Hum. Reprod. 2000; 15(12): 2653-8.

24. Cicinelli E., de Ziegler D. Transvaginal progesterone: evidence for a new functional ‘portal system’ flowing from the vagina to the uterus. Hum. Reprod. Update. 1999; 5(4): 365-72.

Поступила 09.06.2017

Принята в печать 23.06.2017

Об авторах / Для корреспонденции

Бабаян Алина Анатольевна, к.м.н., врач отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени проф. Б.В. Леонова ФГБУ НЦАГиП им. академика
В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-25-01. E-mail: alinababayan@yandex.ru
Николаева Марина Аркадьевна, д.б.н., ведущий научный сотрудник лаборатории клинической иммунологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова
Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: nikolaeva_ma@mail.ru
Смольникова Вероника Юрьевна, д.м.н., ведущий научный сотрудник отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени проф. Б.В. Леонова
ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-25-01. E-mail: v_smolnikova@oparina4.ru
Степанова Елена Олеговна, младший научный сотрудник лаборатории клинической иммунологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (962) 954-44-21. E-mail: elena2404.07@mail.ru
Донцова Татьяна Владимировна, аспирант отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-25-01. E-mail: dr.dontsova@gmail.com
Калинина Елена Анатольевна, д.м.н., доцент, руководитель отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени проф. Б.В. Леонова ФГБУ НЦАГиП
им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-13-42. E-mail: e_kalinina@oparina4.ru
Ванько Людмила Викторовна, д.м.н., профессор, ведущий научный сотрудник лаборатории клинической иммунологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: LVanko@oparina4.ru
Иванец Татьяна Юрьевна, к.м.н., зав. отделением, клинико-диагностическая лаборатория ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: t_ivanets@oparina4.ru
Кречетова Любовь Валентиновна, к.м.н., заведующая лабораторией клинической иммунологии ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-11-83. E-mail: l_krechetova@oparina4.ru
Сухих Геннадий Тихонович, академик РАН, д.м.н., профессор, директор ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. E-mail: g_sukhikh@oparina4.ru

Для цитирования: Бабаян А.А., Николаева М.А., Смольникова В.Ю., Степанова Е.О., Донцова Т.В., Ванько Л.В., Иванец Т.Ю., Калинина Е.А., Кречетова Л.В., Сухих Г.Т. Роль иммунорегуляторного потенциала семенной плазмы в лечении бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения. Акушерство и гинекология. 2018; 3: 76-82.
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2018.3.76-82

Также по теме

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.