Исследование белка PCP4 как потенциального опухолевого маркера лейомиомы матки

DOI

https://dx.doi.org/10.18565/aig.2025.171

Кузнецова М.В., Шевелев А.Б., Позднякова Н.В., Самойлова Д.В., Выпряжкина В.Е., Тоноян Н.М., Трубникова Е.В., Зеленский Д.В., Вишнякова П.А.
1) ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва, Россия; 2) Институт общей генетики имени Н.И. Вавилова Российской академии наук, Москва, Россия; 3) ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии имени Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва, Россия; 4) Научно-исследовательский институт морфологии человека имени академика А.П. Авцына ФГБНУ «Российский научный центр хирургии имени академика Б.В. Петровского», Москва, Россия; 5) ФГБОУ ВО «Курский государственный университет», Курск, Россия; 6) ФГАОУ ВО «Российский университет дружбы народов имени Патриса Лумумбы», Москва, Россия

Цель: Оценка возможной роли белка PCP4 как потенциального опухолевого маркера лейомиомы матки с помощью измерения титра антител к этому белку в сыворотках крови и применимости такой методики для оценки белков как потенциальных вакцинных антигенов.
Материалы и методы: Клонирован фрагмент кДНК, содержащий ген PCP4 из узла лейомиомы, сконструирован продуцент растворимого химерного белка PCP4-GFP на основе E. coli, проведена очистка рекомбинантного белка, после чего он был использован для исследования предельного титра антител в сыворотках крови больных с применением непрямого иммуноферментного анализа. Сыворотки доноров крови (24 образца) отбирали среди пациентов, проходивших лечение в НМИЦ АГП
им. В.И. Кулакова МЗ РФ, давших информированное согласие на участие в исследовании. Для исследования иммунологической активности сывороток в отношении белка 6His-PCP4hs-GFP было сформировано четыре группы пациентов: контрольная группа мужчин; группа женщины без диагностированных миом, у которых в анамнезе имелось пять или более успешно завершившихся беременностей, группа женщин с миомами, также с пятью или более успешно завершившимися беременностями, а также женщины с рецидивирующими миомами.
Результаты: Из кДНК миоматозного узла с драйверной мутацией в гене MED12 была получена экспрессионная конструкция в векторе pRSET-EmGFP, содержащая ген PCP4 и репортерный ген зеленого флуоресцентного белка EmGFP. С помощью данной конструкции, встроенной в геном E. coli, удалось получить белок человека PCP4 в препаративных количествах, достаточных для изучения его реакции с антителами из сывороток крови различных групп пациентов. Наиболее высокую иммунологическую реактивность в отношении белка 6His-PCP4hs-GFP показали сыворотки контрольной группы мужчин, тогда как группы женщин в среднем незначительно отличались друг от друга: минимальное различие выявлено между сыворотками групп 2 и 4, причем реакция сывороток женщин с рецидивирующими миомами оказалась выше, чем сывороток женщин без миом, имевших пять или более успешно завершившихся беременностей. При сравнении женщин групп 3 и 4 обнаружены статистически значимые различия в значениях оптической плотности, полученных при разведении сывороток 1:1600, 1:3200 и 1:6400, причем реакция сывороток женщин с рецидивирующими миомами оказалась выше, чем сывороток женщин с миомами, имевших пять или более успешно завершившихся беременностей. После распределения сывороток на три категории по уровню активности было показано, что реакция сывороток мужчин на антиген 6His-PCP4hs-GFP наиболее выражена (доля высокоактивных сывороток 60%), а в группе женщины без миом, имевших пять или более успешно завершившихся беременностей, доля низкоактивных сывороток составила 44%, что является максимальным показателем по сравнению с другими группами. Для группы женщин с миомами, имевших пять или более успешно завершившихся беременностей, наиболее характерен средний уровень реактивности с антигеном 6His-PCP4hs-GFP: на долю этой категории приходится 75% сывороток, что является максимальным показателем среди всех групп. Наконец, для группы женщин с рецидивирующими миомами характерно равное количество сывороток с высокой средней активностью, что показывает большую склонность пациенток этой группы к выработке антител против PCP4/PEP19 по сравнению с многорожавшими женщинами.
Заключение: Впервые был получен белок PCP4 человека в препаративных количествах, достаточных для изучения его реакции с антителами из сывороток различных групп пациентов. Тестирование показало, что большая часть образцов во всех группах имеет значимые титры антител к PCP4. Активность этих антител варьирует в широких пределах в сыворотках как мужчин, так и женщин. Антитела против PCP4 встречаются чаще у женщин с рецидивирующими миомами, чем у много рожавших женщин, особенно без лейомиом. Таким образом, иммунизация PCP4 вряд ли сопряжена с риском возникновения каких-либо патологий. Титры антител к PCP4 у общей группы многорожавших женщин значимо ниже, чем у мужчин и пациенток с рецидивирующими миомами. Таким образом, использование белка PCP4 в качестве основы для создания профилактической вакцины для защиты от лейомиом нецелесообразно.

Вклад авторов: Кузнецова М.В, Шевелев А.Б. – обзор литературы, концепция и дизайн исследования; Позднякова Н.В. – клонирование белка; Выпряжкина В.Е. – идентификация белков, блот-анализ; Трубникова Е.В., Зеленский Д.В. – статистическая обработка данных; Кузнецова М.В., Шевелев А.Б. – написание текста; Вишнякова П.А. – финальное редактирование текста.
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии возможных конфликтов интересов.
Финансирование: Проект РНФ 23-15-00069 «Разработка профилактической вакцины для предотвращения развития лейомиомы матки у пациенток, планирующих беременность».
Одобрение Этического комитета: Исследование было одобрено Этическим комитетом ФГБУ «НМИЦ АГП
им. В.И. Кулакова» Минздрава России.
Согласие пациентов на публикацию: Все пациентки подписали добровольное информированное согласие на публикацию полученных данных.
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Кузнецова М.В., Шевелев А.Б., Позднякова Н.В., Самойлова Д.В., Выпряжкина В.Е.,
Тоноян Н.М., Трубникова Е.В., Зеленский Д.В., Вишнякова П.А. Исследование белка PCP4 как
потенциального опухолевого маркера лейомиомы матки.
Акушерство и гинекология. 2025; 8: 159-171
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2025.171

миома матки

экспрессия генов

PCP4

Полный текст статьи
доступен в "Библиотеке Врача"

Уварова Е.В., Адамян Л.В., Стрижакова М.А. и др. Рецидивирующая миома матки у юной пациентки (клиническое наблюдение). Репродуктивное здоровье детей и подростков. 2005; 1: 53-7.
Краснопольский В.И., Буянова С.Н., Щукина Н.А., Попов А.А. Оперативная гинекология. М.: МЕДпресс-информ; 2010. 319 с.
Pavone D., Clemenza S., Sorbi F., Fambrini M., Petraglia F. Epidemiology and risk factors of uterine fibroids. Best Pract. Res. Clin. Obstet. Gynaecol. 2018; 46: 3-11. https://dx.doi.org/10.1016/j.bpobgyn.2017.09.004
Печетов А.А., Леднев А.Н., Ратникова Н.К., Волчанский Д.А. Доброкачественная метастазирующая лейомиома матки с метастазированием в легкие: проблемы диагностики и лечения. Хирургия. Журнал имени Н.И. Пирогова. 2020; (9): 85-8.
Torres-de la Roche L.A., Becker S., Cezar C., Hermann A., Larbig A., Leicher L. et al. Pathobiology of myomatosis uteri: the underlying knowledge to support our clinical practice. Arch. Gynecol. Obstet. 2017; 296(4): 701-7. https://dx.doi.org/10.1007/s00404-017-4494-6
Wu J.M., Wechter M.E., Geller E.J., Nguyen T.V., Visco A.G. Hysterectomy rates in the Unites States, 2003. Obstet. Gynecol. 2007; 110(5): 1091-5 https://dx.doi.org/10.1097/01.aog.0000285997.38553.4b
González V.G, Moreta A.H., Triana A.M., Sierra L.R., García I.C., Méndez N.I. Prolapsed cervical myoma during pregnancy. Eur. J. Obstet. Gynecol. Reprod. Biol. 2020; 252: 150-4. https://dx.doi.org/10.1016/j.ejogrb.2020.06.039
Согоян Н.С., Кузнецова М. В., Донников А. Е., Мишина Н.Д., Михайловская Г.В., Шубина Е.С., Зеленский Д.В., Муллабаева С.М., Адамян Л.В. Семейная предрасположенность к развитию лейомиомы матки: поиск генетических факторов, повышающих риск развития заболевания. Проблемы репродукции. 2020; 26(5): 51-7.
Marugo M., Centonze M., Bernasconi D., Fazzuoli L., Berta S., Giordano G. Estrogen and progesterone receptors in uterine leiomyomas. Acta Obstet. Gynecol. Scand. 1989; 68(8): 731-5. https://dx.doi.org/10.3109/00016348909006147
Kuznetsova M.V., Tonoyan N.M., Trubnikova E.V., Zelensky D.V., Svirepova K.A., Adamyan L.V. et al. Novel approaches to possible targeted therapies and prophylaxis of uterine fibroids. Diseases. 2023; 11(4): 156. https://dx.doi.org/10.3390/diseases11040156
Ceja-Navarro J.A., Brodie E.L., Vega F.E. A technique to dissect the alimentary canal of the coffee berry borer (Hypothenemus hampei), with isolation of internal microorganisms. Journal of Entomological and Acarological Research. 2012; 44(3): e21.117-9. https://dx.doi.org/10.4081/jear.2012.e21
Maekawa T., Kashkar H., Coll N.S. Dying in self-defence: a comparative overview of immunogenic cell death signalling in animals and plants. Cell Death Differ. 2023; 30(2): 258-68. https://dx.doi.org/10.1038/s41418-022-01060-6
Renelt M., von Bohlen und Halbach V., von Bohlen und Halbach O. Distribution of PCP4 protein in the forebrain of adult mice. Acta Histochem. 2014; 116(6): 1056-61. https://dx.doi.org/10.1016/j.acthis.2014.04.012
Felizola S.J., Nakamura Y., Ono Y., Kitamura K., Kikuchi K., Onodera Y. et al. PCP4: a regulator of aldosterone synthesis in human adrenocortical tissues. J. Mol. Endocrinol. 2014; 52(2): 159-67. https://dx.doi.org/10.1530/JME-13-0248
Yoshimura T., Higashi S., Yamada S., Noguchi H., Nomoto M., Suzuki H. et al. PCP4/PEP19 and HER2 are novel prognostic markers in mucoepidermoid carcinoma of the salivary gland. Cancers (Basel). 2022; 14(1): 54. https://dx.doi.org/10.3390/cancers14010054
Kitazono I., Hamada T., Yoshimura T., Kirishima M., Yokoyama S., Akahane T. et al. PCP4/PEP19 downregulates neurite outgrowth via transcriptional regulation of Ascl1 and NeuroD1 expression in human neuroblastoma M17 cells. Lab. Invest. 2020; 100(12): 1551-63. https://dx.doi.org/10.1038/s41374-020-0462-z
Honjo K., Hamada T., Yoshimura T., Yokoyama S., Yamada S., Tan Y.Q. et al. PCP4/PEP19 upregulates aromatase gene expression via CYP19A1 promoter I.1 in human breast cancer SK-BR-3 cells. Oncotarget. 2018; 9(51): 29619-33. https://dx.doi.org/10.18632/oncotarget.25651
He L., Lee G.T., Zhou H., Buhimschi I.A., Buhimschi C.S., Weiner C.P. et al. Expression, regulation and function of the calmodulin accessory protein PCP4/PEP-19 in myometrium. Reprod. Sci. 2019; 26(12): 1650-60. https://dx.doi.org/19.1177/1933719119828072
Бурменская О.В., Трофимов Д.Ю., Кометова В.В., Сергеев И.В., Маерле А.В., Родионов В.В., Сухих Г.Т. Разработка и опыт использования транскрипционной сигнатуры генов в диагностике молекулярных подтипов рака молочной железы. Акушерство и гинекология. 2020; 2: 132-40.
Prodan N., Ershad F., Reyes-Alcaraz A., Li L., Mistretta B., Gonzalez L. et al. Direct reprogramming of cardiomyocytes into cardiac Purkinje-like cells. iScience. 2022; 25(11): 105402. https://dx.doi.org/10.1016/j.isci.2022.105402
Xie Y.Y., Sun M.M., Lou X.F., Zhang C., Han F., Zhang B.Y. et al. Overexpression of PEP-19 suppresses angiotensin II-induced cardiomyocyte hypertrophy. J. Pharmacol. Sci. 2014; 125(3): 274-82. doi: 10.1254/jphs.13208fp
Mouton-Liger F., Sahún I., Collin T., Lopes Pereira P., Masini D., Thomas S. et al. Developmental molecular and functional cerebellar alterations induced by PCP4/PEP19 overexpression: implications for Down syndrome. Neurobiol. Dis. 2014; 63: 92-106. https://dx.doi.org/10.1016/j.nbd.2013.11.016
Aji G., Li F., Chen J., Leng F., Hu K., Cheng Z. et al. Upregulation of PCP4 in human aldosterone-producing adenomas fosters human adrenocortical tumor cell growth via AKT and AMPK pathway. Int. J. Clin. Exp. Pathol. 2018; 11(3): 1197-207.
He J., Baxter S.L., Xu J., Xu J., Zhou X., Zhang K. The practical implementation of artificial intelligence technologies in medicine. Nat. Med. 2019; 25(1): 30-6. https://dx.doi.org/10.1038/s41591-018-0307-0
Yoshimura A., Yamada T., Okuma Y., Fukuda A., Watanabe S., Nishioka N. et al. Impact of tumor programmed death ligand-1 expression on osimertinib efficacy in untreated EGFR-mutated advanced non-small cell lung cancer: a prospective observational study. Transl. Lung Cancer Res. 2021; 10(8): 3582-93. https://dx.doi.org/10.21037/tlcr-21-461
Kitazono I., Hamada T., Yoshimura T., Kirishima M., Yokoyama S., Akahane T. et al. PCP4/PEP19 downregulates neurite outgrowth via transcriptional regulation of Ascl1 and NeuroD1 expression in human neuroblastoma M17 cells. Lab. Invest. 2020; 100(12): 1551-63. https://dx.doi.org/10.1038/s41374-020-0462-z
Guo Z.S. The 2018 Nobel Prize in medicine goes to cancer immunotherapy (editorial for BMC cancer). BMC Cancer. 2018; 18(1): 1086. https://dx.doi.org/10.1186/s12885-018-5020-3

Поступила 26.06.2025

Принята в печать 11.08.2025

Кузнецова Мария Владимировна, к.б.н., с.н.с. лаборатории молекулярно-генетически методов Института репродуктивной генетики, НМИЦ АГП им. акад. В.И. Кулакова Минздрава России, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, +7(495)438-13-41, mkarja@mail.ru, https://orcid.org/0000-0003-3790-0427
Шевелев Алексей Борисович, главный н.с., Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН, 119991, Россия, ГСП-1, Москва, ул. Губкина, д. 3, +7(915)087-52-93, shevel_a@hotmail.com, https://orcid.org/0000-0003-3564-7405
Позднякова Наталья Владимировна, к.б.н., с.н.с. лаборатории радионуклидных и лучевых технологий в экспериментальной онкологии, НМИЦ онкологии
им. Н.Н. Блохина Минздрава России, 115230, Россия, Москва, Каширское шоссе, д. 23, +7(977)767-99-90, natpo2002@mail.ru, https://orcid.org/0000-0002-5765-3016
Самойлова Дарья Викторовна, н.с. центральной патологоанатомической лаборатории, НИИ морфологии человека им. акад. А.П. Авцына, Российский научный центр хирургии им. акад. Б.В. Петровского, 109548, Россия, Москва, ул. Угрешская, д. 2, стр. 7, +7(916)594-89-06, dashasam@mail.ru, https://orcid.org/0000-0001-5639-0835
Выпряжкина Виктория Евгеньевна, к.б.н., с.н.с. лаборатории молекулярно-генетических методов Института репродуктивной генетики,
НМИЦ АГП им. акад. В.И. Кулакова Минздрава России, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, +7(495)438-13-41.
Тоноян Нарине Марзпетуновна, к.м.н., врач, НМИЦ АГП им. акад. В.И. Кулакова Минздрава России, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, SPIN: 8547-9399, Scopus AuthorID: 57213609878, https://orcid.org/0000-0002-1631-1829
Трубникова Елена Владимировна, д.б.н., доцент, главный н.с. НИЛ генетики, Курский государственный университет, 305000, Россия, Курск, ул. Радищева, д. 33;
в.н.с., Институт общей генетики им. Н.И. Вавилова РАН, 119991, Россия, ГСП-1, Москва, ул. Губкина, д. 3, +7(910)311-18-86, tr_e@list.ru,
https://orcid.org/0000-0001-5025-9406
Зеленский Дмитрий Вячеславович, аспирант, Курский государственный университет, 305000, Россия, Курск, ул. Радищева, д. 33, +7(999)700-38-81,
dmitriizelenskii@mail.ru, https://orcid.org/0000-0006-0490-7760
Вишнякова Полина Александровна, к.б.н., заведующая лабораторией регенеративной медицины, НМИЦ АГП им. акад. В.И. Кулакова Минздрава России, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4; заведующая лабораторией молекулярной патофизиологии НИИ молекулярной и клеточной медицины, Российский университет дружбы народов им. Патриса Лумумбы, Москва, Scopus AuthorID: 57190971385, https://orcid.org/0000-0001-8650-8240
Автор, ответственный за переписку: Мария Владимировна Кузнецова, mkarja@mail.ru

Исследование белка PCP4 как потенциального опухолевого маркера лейомиомы матки

Кузнецова М.В., Шевелев А.Б., Позднякова Н.В., Самойлова Д.В., Выпряжкина В.Е., Тоноян Н.М., Трубникова Е.В., Зеленский Д.В., Вишнякова П.А.

Ключевые слова

Список литературы

Об авторах / Для корреспонденции

Также по теме