Сравнительный анализ транскриптов клеток кумулюса при использовании различных триггеров овуляции в программах вспомогательных репродуктивных технологий

Ипен С.М., Бурменская О.В., Павлович С.В., Левков Л.А., Сыркашева А.Г., Кодылева Т.А., Абубакиров А.Н., Мишиева Н.Г., Трофимов Д.Ю.

1ФГБУ НЦАГиП им. В.И. Кулакова Минздрава, Москва, России 2ИПО ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России
Цель исследования. Изучение транскрипционного профиля (транскриптов) клеток кумулюса при использовании агониста гонадотропин рилизинг гормона (а-ГнРГ) или человеческого хорионического гонадотропина (чХГ) в качестве триггера овуляции. Материал и методы. В ходе проведенного исследования были проанализированы 179 образцов кумулюсных клеток от 35 пациенток, проходивших программу ЭКО/ИКСИ. Пациентки были разделены на 2 группы с учетом введенного триггера овуляции: I группа (n=17), где триггером являлся чХГ в дозе 10000 МЕ; II группа (n=18), где триггером являлся а-ГнРГ в дозе 0,2 мг. Был исследован уровень экспрессии мРНК 13 генов в кумулюсных клетках методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) в реальном времени Результаты. Были выявлены различия в экспрессии CALM2 (0,08 против 0,05; P<0.0001), TRPM7 (0,82 против 0,70; P=0.007), ALCAM (0,26 против 0,37; P=.0008) и PFKP (3,46 против 4,70; P=0.0005). Все изменения были менее, чем в 2 раза. Экспрессия мРНК гена TP53I3 была выше в клетках кумулюса ооцитов, которые в дальнейшем сформировали бластоцисту (0,3 против 0,23; P=0,0304).

Ключевые слова

кумулюсные клетки
экспрессия генов
а-ГнРГ триггер
экстракорпоральное оплодотворение
бластоциста

Список литературы

1. Homburg R. The physiology of ovulation. In: Homburg R. Ovulation induction and controlled ovarian stimulation. A practical guide. Springer;2014: 7-23.

2. Humaidan P., Papanikolaou E.G., Tarlatzis B.C. Reply: GnRHa to trigger final oocyte maturation: a time to reconsider. Hum. Reprod. 2010; 25(3): 807-8.

3. Acevedo B., Gomez-Palomares J.L., Ricciarelli E., Hernández E.R. Triggering ovulation with gonadotropin-releasing hormone agonists does not compromise embryo implantation rates. Fertil. Steril. 2006; 86(6): 1682-7.

4. Casper R.F. Reducing the risk of OHSS by GnRH agonist triggering. J. Clin. Endocrinol. Metab. 2015; 100(12): 4396-8.

5. Ding L.J., Wang B., Shen X.Y., Yan G.J., Zhang N.Y., Hu Y.L. et al. Withdrawal of GnRH agonist decreases oestradiol and VEGF concentrations in high responders. Reprod. Biomed. Online. 2013; 27(2): 131-9.

6. Andersen C., Humaidan P., Ejdrup H., Bungum L., Grondahl M., Westergaard L. Hormonal characteristics of follicular flluid from women receiving either GnRH agonist or hCG for ovulation. Hum. Reprod. 2006; 21(8): 2126-30.

7. Humaidan P., Westergaard L., Mikkelsen L., Fukuda A., Yding Andersen C. Levels of the epidermal growth factor-like peptide amphiregulin in follicular fluid reflect the mode of triggering ovulation: a comparison between gonadotrophin-releasing hormone agonist and urinary human chorionic gonadotrophin. Fertil. Steril. 2011; 95(6): 2034-8.

8. Cerrillo M., Pacheco A., Rodriguez S., Delgado F., Pellicer A., García-Velasco J. Effect of GnRH agonist and hCG treatment on VEGF, angiopoietin-2, and VE-cadherin: trying to explain the link to ovarian hyperstimulation syndrome. Fertil. Steril. 2011; 95(8): 2517-9.

9. Haas J., Ophir L., Barzilay E., Yerushalmi G.M., Yung Y., Kedem A. et al. GnRH agonist vs. hCG for triggering of ovulation – differential effects on gene expression in human granulosa cells. PLoS One. 2014; 9(3): e90359.

10. Gebhardt K.M., Feil D.K., Dunning K.R., Lane M., Russell D.L. Human cumulus cell gene expression as a biomarker of pregnancy outcome after single embryo transfer. Fertil. Steril. 2011; 96(1): 47-52. e2.

11. Ekart J., Mcnatty K., Hutton J., Pitman J. Ranking and selection of MII oocytes in human ICSI cycles using gene expression levels from associated cumulus cells. Hum. Reprod. 2013; 28(11): 2930-42.

12. Мартазанова Б.А., Мишиева Н.Г., Абубакиров А.Н. Замена триггера овуляции как метод профилактики развития синдрома гиперстимуляции яичников. Акушерство и гинекология. 2014; 5: 15-8.

13. Мартазанова Б.А., Мишиева Н.Г., Ведихина И.А., Аксененко А.А., Ипен С.М., Ибрагимова М.Х., Иванец Т.Ю., Абубакиров А.Н. Гормональный профиль после замены триггера овуляции у женщин с высоким риском развития синдрома гиперстимуляции яичников. Акушерство и гинекология. 2015; 6: 84-90.

14. Engmann L., DiLuigi A., Schmidt D., Nulsen J., Maier D., Benadiva C. The use of gonadotropin-releasing hormone (GnRH) agonist to induce oocyte maturation after cotreatment with GnRH antagonist in high-risk patients undergoing in vitro fertilization prevents the risk of ovarian hyperstimulation syndrome: a prospective randomized controlled study. Fertil. Steril. 2008; 89(1): 84-91.

15. Gurbuz A.S., Gode F., Uzman M.S., Ince B., Kaya M., Ozcimen N. et al. GnRH agonist triggering affects the kinetics of embryo development: a comparative study. J. Ovarian Res. 2016; 9: 22.

16. Anderson R.A., Sciorio R., Kinnell H., Bayne R.A., Thong K.J., de Sousa P.A., Pickering S. Cumulus gene expression as a predictor of human oocyte fertilisation, embryo development and competence to establish a pregnancy. Reproduction. 2009; 138(4): 629-37.

17. Fragouli E., Wells D., Iager A.E., Kayisli U.A., Patrizio P. Alteration of gene expression in human cumulus cells as a potential indicator of oocyte aneuploidy. Hum. Reprod. 2012; 27(8): 2559-68.

18. Assou S., Haouzi D., De Vos J., Hamamah S. Human cumulus cells as biomarkers for embryo and pregnancy outcomes. Mol. Hum. Reprod. 2010; 16(8): 531-8.

19. Wathlet S., Adriaenssens T., Segers I., Verheyen G., Van de Velde H., Coucke W. et al. Cumulus cell gene expression predicts better cleavage-stage embryo or blastocyst development and pregnancy for ICSI patients. Hum. Reprod. 2011; 26(5): 1035-51.

20. Fujiwara H., Tatsumi K., Kosaka K., Sato Y., Higuchi T., Yoshioka S. et al. Human blastocysts and endometrial epithelial cells express activated leukocyte cell adhesion molecule (ALCAM/CD166). J. Clin. Endocrinol. Metab. 2003; 88(7): 3437-43.

21. Borgbo T., Povlsen B.B., Andersen C.Y., Borup R., Humaidan P., Grøndahl M.L. Comparison of gene expression profiles in granulosa and cumulus cells after ovulation induction with either human chorionic gonadotropin or a gonadotropin-releasing hormone agonist trigger. Fertil. Steril. 2013; 100(4): 994-1001.

22. Yerushalmi G.M., Salmon-Divon M., Yung Y., Maman E., Kedem A., Ophir L. et al. Characterization of the human cumulus cell transcriptome during final follicular maturation and ovulation. Mol. Hum. Reprod. 2014; 20(8): 719-35.

23. de los Santos M.J., García-Láez V., Beltrán-Torregrosa D., Horcajadas J.A., Martínez-Conejero J.A., Esteban F.J. et al. Hormonal and molecular characterization of follicular fluid, cumulus cells and oocytes from pre-ovulatory follicles in stimulated and unstimulated cycles. Hum. Reprod. 2012; 27(6): 1596-605.

Поступила 16.12.2017

Принята в печать 23.12.2017

Об авторах / Для корреспонденции

Ипен Снеха Мари, аспирант ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России. Адрес: 119991, Россия, Москва, ул. Большая Пироговская, д. 2-4. Телефон: 8 (926) 003-26-00. Е-mail: dr.snehaeapen@gmail.com
Бурменская Ольга Владимировна, д.б.н., с.н.с. лаборатории молекулярно-генетических методов ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-13-41. E-mail: o_bourmenskaya@oparina4.ru
Павлович Станислав Владиславович, к.м.н., ученый секретарь ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-20-88. E-mail: s_pavlovich@oparina4.ru
Левков Лев Алексеевич, к.м.н., советник директора, научный консультант по клинической эмбриологии 1-го гинекологического отделения ФГБУ НЦАГиП
им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (985) 861-63-44. Е-mail: l_levkov@oparina4.ru
Сыркашева Анастасия Григорьевна, научный сотрудник отдела научного планирования и аудита ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117815, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-25-01. E-mail: anast.syrkasheva@gmail.com
Кодылева Татьяна Александровна, эмбриолог 1 -го гинекологического отделения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Телефон: 8 (495) 438-26-22. E-mail: t_kodyleva@oparina4.ru
Абубакиров Айдар Назимович, к.м.н., руководитель 1-го гинекологического отделения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-26-22. Е-mail: nondoc555@yahoo.com
Мишиева Нонна Годовна, д.м.н., в.н.с. 1-го гинекологического отделения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-26-22. E-mail: nondoc555@mail.ru
Трофимов Дмитрий Юрьевич, д.б.н., зав. отделом клинической и молекулярной генетики ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, России, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (916) 614-49-22. E-mail: d_trofimov@oparina4.ru

Для цитирования: Ипен С.М., Бурменская О.В., Павлович С.В., Левков Л.А.,
Сыркашева А.Г., Кодылева Т.А., Абубакиров А.Н., Мишиева Н.Г., Трофимов Д.Ю. Сравнительный анализ транскриптов клеток кумулюса при использовании различных триггеров овуляции в программах вспомогательных репродуктивных технологий. Акушерство и гинекология. 2017; 5: 82-8.
http://dx.doi.org/10.18565/aig.2017.5.82-8

Также по теме

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.