Протеомный анализ цервиковагиналь­ной жидкости при применении активированной гли­цир­ризиновой кислоты у пациенток с ВПЧ-ассо­циированными поражениями шейки матки

Франкевич В.Е., Назарова Н.М., Довлетханова Э.Р., Гусаков К.И., Кононихин А.С., Бугрова А.Е., Бржозовский А.Г., Прилепская В.Н., Стародубцева Н.Л., Сухих Г.Т.

1) ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова» Минздрава России, Москва, Россия; 2) Сколковский институт науки и технологий, Москва, Россия; 3) ФГБУН «Институт биохимической физики имени Н.М. Эмануэля» Российской академии наук, Москва, Россия
Цель: Определение особенностей протеома цервиковагинальной жидкости (ЦВЖ) при ВПЧ-ассоциированных поражениях шейки матки с применением активированной глицирризиновой кислоты (АГК).
Материалы и методы: В исследование были включены 80 ВПЧ-позитивных пациенток в возрасте от 18 до 49 лет с результатами цитологии: NILM, хронический цервицит (группа I, n=40) и LSIL (группа II, n=40). Все пациентки получали препарат с действующим веществом АГК («Эпиген Интим» спрей 0,1%) в течение 18 месяцев по протоколу. Протеомный состав ЦВЖ анализировался методом ВЭЖХ-МС/МС в четырех временных точках (до начала терапии, через 6, 12 и 18 месяцев).
Результаты: В протеомном исследовании нами было проведено сравнение двух групп образцов ЦВЖ от 10 пациенток после применения АГК: 1-я группа (n=5) – «положительная динамика» (элиминация ВПЧ); 2-я группа (n=5) – «без динамики» (персистенция ВПЧ). При сравнении протеомного состава образцов ЦВЖ в динамике было выявлено изменение 48 белков, уровень 27 белков повышался в группе с положительной динамикой, в то время как уровень 21 белка снижался относительно группы «без динамики». Аннотация белков, увеличивающих свой уровень, выявила их участие в процессах иммунной системы (MPO, AZU1, LYZ, RNASE7, PPL, TXN, CD59, UBA52, CRISP3, ELANE), в частности, во врожденном иммунном ответе (MPO, AZU1, LYZ, RNASE7, TXN, CD59, UBA52, CRISP3, ELANE), а также в процессе дегрануляции нейтрофилов (MPO, AZU1, LYZ, CD59, CRISP3, ELANE), антимикробной активности (AZU1, ELANE).
Заключение: Результаты данного исследования свидетельствуют о влиянии длительного местного применения АГК на уровень белков ЦВЖ при «малых» поражениях шейки матки, в частности, на снижение провоспалительных белков при элиминации ВПЧ.

Ключевые слова

неопластические поражения
рак шейки матки
цервиковагинальная жидкость
протеом
масс-спектрометрия
элиминация ВПЧ
активированная глицирризиновая кислота

Список литературы

  1. Garg M., Singhal T., Sharma H. Cardioprotective effect of ammonium glycyrrhizinate against doxorubicin-induced cardiomyopathy in experimental animals. Indian J. Pharmacol. 2014; 46(5): 527-30. https://dx.doi.org/10.4103/0253-7613.140585.
  2. Gage J.C., Hunt W.C., Schiffman M., Katki H.A., Cheung L.C., Cuzick J. et al.; New Mexico HPV Pap Registry Steering Committee. Risk stratification using human papillomavirus testing among women with equivocally abnormal cytology: results from a state-wide surveillance program. Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev. 2016; 25(1): 36-42. https://dx.doi.org/10.1158/1055-9965.EPI-15-0669.
  3. Бебнева Т.Н., Прилепская В.Н. Папилломавирусная инфекция и патология шейки матки. Гинекология. 2013; 3(3): 77-81.
  4. Kaufman R., Adam E., Vonka N. HPV-infection and cervical carcinoma. Clin. Obstet. Gynecol. 2013; 43(2): 363-80. https://dx.doi.org/10.1097/00003081-200006000-00016.
  5. Colmenares V., Noyola D.E., Monsiváis-Urenda A., Salgado-Bustamante M., Estrada-Capetillo L., González-Amaro R., Baranda L. Human papillomavirus immunization is associated with increased expression of different innate immune regulatory receptors. Clin. Vaccine Immunol. 2012; 19(7): 1005-11. https://dx.doi.org/10.1128/CVI.00043-12.
  6. Gusakov K., Nazarova N. , Frankevich V., Starodubtseva N., Prilepskaya V., Burmenskaya O., Kononikhin A., Bugrova A., Brzhozovskiy A., Dovletkhanova E., Abakarova P. Mass-spectrometry proteome analysis in QHPV vaccinated women. IPVC 2021 34th International Papillomavirus Conference Research and Education for HPV Elimination. Abstract E-book. 2021; 110.
  7. Гусаков К.И., Франкевич В.Е., Назарова Н.М., Прилепская В.Н., Стародубцева Н.В., Чаговец В.В., Кононихин А.С., Бржозовский А.Г. Определение ранних маркеров ВПЧ-ассоциированных заболеваний шейки матки в ЦВЖ вакцинированных женщин методом масс-спектрометрии Материалы XXVII Всероссийского конгресса с международным участием «Амбулаторно-поликлиническая помощь в эпицентре женского здоровья». Москва; 2021: 38-9.
  8. Гусаков К.И., Назарова Н.М., Франкевич В.Е., Стародубцева Н.Л., Бурменская О.В., Прилепская В.Н., Сухих Г.Т. Результаты генотипирования вируса папилломы человека у женщин репродуктивного возраста, вакцинированных от вируса папилломы человека. Акушерство и гинекология. 2020; 9: 114-9.
  9. Starodubtseva N.L., Brzhozovskiy A.G., Bugrova A.E., Kononikhin A.S., Indeykina M.I., Gusakov K.I., Chagovets V.V., Nazarova N.M., Frankevich V.E., Sukhikh G.T., Nikolaev E.N. Label-free cervicovaginal fluid proteome profiling reflects the cervix neoplastic transformation. J. Mass Spectrom. 2019; 54(8): 693-703. https://dx.doi.org/10.1002/jms.4374.
  10. Стародубцева Н.Л., Бржозовский А.Г., Бугрова А.Е., Кононихин А.С., Гусаков К.И., Назарова Н.М. Характеристика динамических изменений протеомного состава цервиковагинальной жидкости при заболеваниях шейки матки, ассоциированных с ВПЧ-инфекцией. Акушерство и гинекология. 2020; 7: 111-6.
  11. Farooqui A., Khan F., Khan I., Ansari I.A. Glycyrrhizin induces reactive oxygen species-dependent apoptosis and cell cycle arrest at G0/G1 in HPV18+ human cervical cancer HeLa cell line. Biomed. Pharmacother. 2018; 97: 752-64. https://doi.org/10.1016/j.biopha.2017.10.147.
  12. Eggers C.T., Murray I.A., Delmar V.A., Day A.G., Craik C.S. The periplasmic serine protease inhibitor ecotin protects bacteria against neutrophil elastase. Biochem. J. 2004; 379(Pt 1): 107-18. https://dx.doi.org/10.1042/BJ20031790.
  13. McCabe D., Cukierman T., Gabay J.E. Basic residues in azurocidin/HBP contribute to both heparin binding and antimicrobial activity. J. Biol. Chem. 2002; 277(30): 27477-88. https://dx.doi.org/10.1074/jbc.M201586200.
  14. Ma Z., Chen J., Luan T., Chu C., Wu W., Zhu Y., Gu Y. Proteomic analysis of human cervical adenocarcinoma mucus to identify potential protein biomarkers. PeerJ. 2020; 8: e9527. https://dx.doi.org/10.7717/peerj.9527.
  15. Carrilho C., Alberto M., Buane L., David L. Keratins 8, 10, 13, and 17 are useful markers in the diagnosis of human cervix carcinomas. Hum. Pathol. 2004; 35(5): 546-51. https://dx.doi.org/10.1016/j.humpath.2004.01.021.
  16. Dasgupta S., Ewing-Graham P.C., van Kemenade F.J., van Doorn H.C., Hegt V.N., Koljenović S. Differentiated vulvar intraepithelial neoplasia (dVIN): the most helpful histological features and the utility of cytokeratins 13 and 17. Virchows Arch. 2018; 473(6): 739-47. https://dx.doi.org/10.1007/s00428-018-2436-8.
  17. Marenholz I., Heizmann C.W., Fritz G. S100 proteins in mouse and man: from evolution to function and pathology (including an update of the nomenclature). Biochem. Biophys. Res. Commun. 2004; 322(4): 1111-22. https://dx.doi.org/10.1016/j.bbrc.2004.07.096.
  18. Donato R. Intracellular and extracellular roles of S100 proteins. Microsc. Res.Tech. 2003; 60(6): 540-51. https://dx.doi.org/10.1002/jemt.10296.

Поступила 20.05.2022

Принята в печать 24.05.2022

Об авторах / Для корреспонденции

Франкевич Владимир Евгеньевич, д.ф-м.н., руководитель отдела системной биологии в репродукции, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, +7(495)438-07-88 (доб. 2198), v_frankevich@oparina4.ru,
117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4.
Назарова Нисо Мирзоевна, д.м.н., в.н.с., Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, +7(495)438-14-03, grab2@yandex.ru, 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4.
Довлетханова Эльмира Робертовна, к.м.н., с.н.с. научно-поликлинического отделения, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, e_dovletkhanova@oparina4.ru, https://orcid.org/0000-0002-8243-5272,
117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4.
Гусаков Кирилл Ильич, к.м.н, н.с. научно-поликлинического отделения, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, e-mail: kigusakov@gmail.com, https://orcid.org/0000-0003-3895-8225,
117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4.
Кононихин Алексей Сергеевич, к.ф.-м.н., н.с. лаборатории протеомики репродукции человека, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России; н.с. лаборатории масс-спектрометрии, Сколковский институт науки и технологий, +7(495)438-07-88 (доб. 2198), konoleha@yandex.ru, 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4.
Бугрова Анна Евгеньевна, к.б.н., с.н.с. лаборатории протеомики репродукции человека, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России; с.н.с. лаборатории нейрохимии, Институт биохимической физики им. Н.М. Эмануэля РАН,
+7(926)562-65-90, a_bugrova@oparina4.ru, 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4.
Бржозовский Александр Геннадьевич, н.с. лаборатории протеомики репродукции человека, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России; м.н.с. лаборатории масс-спектрометрии, Сколковский институт науки и технологий, +7(495)438-07-88 (доб. 2198), agb.imbp@gmail.com, 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4.
Прилепская Вера Николаевна, д.м.н., профессор, заведующая поликлиническим отделением, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, +7(495)438-69-34, v_prilepskaya@oparina4.ru,
117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4.
Чаговец Виталий Викторович, к.ф-м.н., с.н.с. лаборатории протеомики и метаболомики репродукции человека, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, +7(916)919-14-66, e-mail: vvchagovets@gmail.com,
117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4.
Стародубцева Наталия Леонидовна, к.б.н., заведующая лабораторией протеомики репродукции человека, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, +7(916)463-98-67, n_starodubtseva@oparina4.ru,
117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4.
Сухих Геннадий Тихонович, академик РАН, д.м.н., профессор, директор, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова Минздрава России, g_sukhikh@oparina4.ru, https://orcid.org/0000-0002-7712-1260, 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4.

Вклад авторов: Сухих Г.Т., Гусаков К.И., Назарова Н.М., Довлетханова Э.Р., Франкевич В.Е., Стародубцева Н.Л., Прилепская В.Н. – концепция и дизайн исследования; Гусаков К.И., Назарова Н.М., Довлетханова Э.Р., Бугрова А.Е., Бржозовский А.Г., Кононихин А.С. – cбор и обработка материала; Бржозовский А.Г., Стародубцева Н.Л., Кононихин А.С. – cтатистическая обработка данных; Стародубцева Н.Л., Назарова Н.М., Гусаков К.И., Кононихин А.С., Бугрова А.Е., Бржозовский А.Г. – написание текста; Франкевич В.Е., Бугрова А.Е., Прилепская В.Н., Сухих Г.Т. – редактирование.
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Финансирование: Работа выполнена без спонсорской поддержки.
Одобрение Этического комитета: Исследование было одобрено Комиссией по этике ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России.
Согласие пациентов на публикацию: Пациенты подписали информированное согласие на публикацию своих данных и изображений.
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Франкевич В.Е., Назарова Н.М., Довлетханова Э.Р.,
Гусаков К.И., Кононихин А.С., Бугрова А.Е., Бржозовский А.Г., Прилепская В.Н., Стародубцева Н.Л., Сухих Г.Т. Протеомный анализ цервиковагинальной жидкости
при применении активированной глицирризиновой кислоты у пациенток
с ВПЧ-ассоциированными поражениями шейки матки.
Акушерство и гинекология. 2022; 5: 109-117
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2022.5.109-117

Также по теме

Продолжая использовать наш сайт, вы даете согласие на обработку файлов cookie, которые обеспечивают правильную работу сайта.