Оптимизация программ вспомогательных репродуктивных технологий у женщин позднего репродуктивного возраста путем сокультивирования ооцитов с донорскими внеклеточными везикулами фолликулярной жидкости
Ахмедова З.Ф., Сысоева А.П., Гаврилов М.Ю., Зингеренко Б.В., Шевцова Ю.А., Силачев Д.Н., Екимов А.Н., Макарова Н.П., Кулакова Е.В., Калинина Е.А.
Актуальность: Эффективность лечения бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) снижается с возрастом женщины из-за старения половых клеток. Ранее показано, что сокультивирование эмбрионов с аутологичными внеклеточными везикулами фолликулярной жидкости (ВВ ФЖ) улучшает эмбриологический этап лечения. Однако у женщин позднего репродуктивного возраста биологические жидкости стареют и теряют эффективность. Поэтому выдвинута гипотеза о применении донорских ВВ ФЖ для улучшения результатов ВРТ.
Цель: Оценить эффективность донорских ВВ ФЖ при сокультивировании эмбрионов женщин старше 40 лет.
Материалы и методы: Исследование проведено среди 79 супружеских пар с бесплодием. Критерии включения: возраст женщины от 40 лет, нормальный кариотип супругов. Пациентки разделены на две группы: основную (n=40) с сокультивированием ооцитов с донорскими ВВ ФЖ и группу сравнения (n=39) со стандартным культивированием. Проведена стимуляция овариальной функции по протоколу с антагонистами гонадотропин рилизинг-гормона. Трансвагинальную пункцию выполняли под анестезией. В группе 1 к оплодотворенным ооцитам добавляли ВВ ФЖ донора. На следующий день выполняли перенос в свежую культуральную среду. Основные параметры оценки: частота оплодотворения, формирования бластоцист и наступления клинической беременности.
Результаты: В группе с донорскими ВВ ФЖ частота оплодотворения была выше (84,8% против 70%, p=0,008), доля отмен переноса эмбрионов ниже (22,5% против 46,1%, p=0,021). Частота наступления беременности и генетически нормальных эмбрионов не отличалась статистически.
Заключение: Донорские ВВ ФЖ улучшают эмбриологические показатели, но не влияют на клинические исходы у женщин позднего репродуктивного возраста.
Вклад авторов: Ахмедова З.Ф. – разработка концепции исследования, сбор материала, обработка данных, написание рукописи статьи; Сысоева А.П. – проведение эмбриологического этапа программы лечения бесплодия, критическое осмысление полученных результатов; Гаврилов М.Ю. – проведение эмбриологического этапа программы лечения бесплодия, выделение внеклеточных везикул; Зингеренко Б.В. – проведение эмбриологического этапа лечения бесплодия, обработка данных; Шевцова Ю.А. – выделение внеклеточных везикул методом ультирацентрифугирования; Силачев Д.Н. – критический анализ рукописи и полученных результатов; Екимов А.Н. – выполнение преимплантационного генетического тестирования; Макарова Н.П. – разработка концепции исследования, обработка данных, написание рукописи; Кулакова Е.В. – критический анализ полученных результатов с точки зрения акушерства и гинекологии; Калинина Е.А. – финальное утверждение рукописи статьи.
Конфликт интересов: Авторы заявляют об отсутствии конфликтов интересов.
Финансирование: Работа выполнена в рамках инициативного научного проекта «Изучение влияния внеклеточных везикул биологических жидкостей репродуктивных органов и тканей на гаметы, процесс оплодотворения и раннего эмбриогенеза человека и имплантации» (2025–2027, руководитель Макарова Н.П.) ФГБУ «НМИЦ АГП
им. В.И. Кулакова» МЗ РФ.
Одобрение этического комитета: Настоящее исследование было поддержано на заседании Комиссии по биоэтике
ФБГУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России (протокол №10 от 20 октября 2022 г.).
Согласие пациентов на публикацию: Пациенты подписали информированное согласие на публикацию своих данных.
Обмен исследовательскими данными: Данные, подтверждающие выводы этого исследования, доступны по запросу у автора, ответственного за переписку, после одобрения ведущим исследователем.
Для цитирования: Ахмедова З.Ф., Сысоева А.П., Гаврилов М.Ю., Зингеренко Б.В., Шевцова Ю.А.,
Силачев Д.Н., Екимов А.Н., Макарова Н.П., Кулакова Е.В., Калинина Е.А. Оптимизация программ вспомогательных репродуктивных технологий у женщин позднего репродуктивного возраста путем сокультивирования ооцитов с донорскими внеклеточными везикулами фолликулярной жидкости.
Акушерство и гинекология. 2025; 8: 133-142
https://dx.doi.org/10.18565/aig.2025.104
Ключевые слова
ВРТ
бесплодие
поздний репродуктивный возраст
сокультивирование
фолликулярная жидкость
внеклеточные везикулы
ЭКО
Список литературы
- Долгушина Н.В., Адамян Л.В., Шешко Е.Л. Поздний репродуктивный возраст женщины: риски нарушения репродуктивной функции (обзор литературы). Проблемы репродукции. 2023; 29(4): 99-106.
- Зингеренко Б.В., Бурменская О.В., Сысоева А.П., Шевцова Ю.А., Силачев Д.Н., Макарова Н.П., Калинина Е.А. Изменение транскрипции генов в клетках кумулюса возрастных женщин под действием внеклеточных везикул фолликулярной жидкости молодых доноров. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2024; 178(12): 767-73.
- Патент №2801339 C1 Российская Федерация, МПК G01N 33/50, A61B 17/435. Способ использования внеклеточных везикул фолликулярной жидкости для увеличения подвижности сперматозоидов человека в программах экстракорпорального оплодотворения: №2022131353: заявл. 01.12.2022: опубл. 07.08.2023. А.П. Сысоева, Н.П. Макарова, Д.Н. Силачев
- Sysoeva A., Akhmedova Z., Nepsha O., Makarova N., Silachev D., Shevtsova Y. et al. Characteristics of the follicular fluid extracellular vesicle molecular profile in women in different age groups in ART programs. Life (Basel). 2024; 14(5): 541. https://dx.doi.org/10.3390/life14050541
- Sysoeva A.P., Nepsha O.S., Makarova N.P., Silachev D.N., Lobanova N.N., Timofeeva A.V. et al. Influence of extracellular vesicles from the follicular fluid of young women and women of advanced maternal age with different miRNA profiles on sperm functional properties. Bull. Exp. Biol. Med. 2022; 173(4): 560-8. https://dx.doi.org/10.1007/s10517-022-05589-x
- Nepsha O.S., Burmenskaya O.V., Akhmedova Z.F., Romanov E.A., Sysoeva A.P., Goryunov K.V. et al. Changes in the transcription of proliferation- and apoptosis-related genes in embryos in women of different ages under the influence of extracellular vesicles from donor follicular fluid in vitro. Bull. Exp. Biol. Med. 2024; 176(5): 658-65. https://dx.doi.org/10.1007/s10517-024-06087-y
- da Silveira J.C., Andrade G.M., Del Collado M., Sampaio R.V., Sangalli J.R., Silva L.A. et al. Supplementation with small-extracellular vesicles from ovarian follicular fluid during in vitro production modulates bovine embryo development. PLOS One. 2017; 12(6): e0179451. https://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0179451
- Российская Aссоциация Репродукции Человека. Оценка ооцитов и эмбрионов в лаборатории ВРТ. Методические рекомендации. М.; 2021. 17 с.
- Sallem A., Santulli P., Barraud-Lange V., Foll N.L., Ferreux L., Maignien C. et al. Extended culture of poor-quality supernumerary embryos improves ART outcomes. J. Assist. Reprod. Genet. 2018; 35(2): 311-9. https://dx.doi.org/10.1007/s10815-017-1063-7
- Биопсия эмбриона на стадии бластоцисты: учебно-методическое пособие для практических занятий по специальности «эмбриология». М.: ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России; 2024. 51 с.
- Довгань А.А., Ахмедова З.Ф., Сысоева А.П., Зингеренко Б.В., Романов Е.А., Силачев Д.Н., Макарова Н.П., Калинина Е.А. Внеклеточные везикулы фолликулярной жидкости: клинические аспекты и молекулярная биология. Акушерство и гинекология. 2023; 6: 38-43.
- Pan Y., Pan C., Zhang C. Unraveling the complexity of follicular fluid: insights into its composition, function, and clinical implications. J. Ovarian Res. 2024; 17(1): 237. https://dx.doi.org/10.1186/s13048-024-01551-9
- Nejabati H.R., Roshangar L., Nouri M. Follicular fluid extracellular vesicle miRNAs and ovarian aging. Clin. Chim. Acta. 2023; 538: 29-35. https://dx.doi.org/10.1016/j.cca.2022.11.003
- Gabryś J., Pietras N., Kowal-Mierzwa W., Karnas E., Andronowska A., Nowak A. et al. Investigating the impact of extracellular vesicle addition during IVM on the fertilization rate of equine oocytes following ICSI. Reprod. Biol. 2024; 24(4): 100967. https://dx.doi.org/10.1016/j.repbio.2024.100967
- Mas-Bargues C., Alique M. Extracellular vesicles as «very important particles» (VIPs) in aging. Int. J. Mol. Sci. 2023; 24(4): 4250. https://dx.doi.org/10.3390/ijms24044250
Поступила 17.04.2025
Принята в печать 11.08.2025
Об авторах / Для корреспонденции
Ахмедова Зумрият Фахрудиновна, аспирант отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. проф. Б.В. Леонова, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии, перинатологии им. акад. В.И. Кулакова МЗ РФ, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4. zyuka-1997@mail.ru, https://orcid.org/0000-0002-4483-8820Сысоева Анастасия Павловна, к.б.н., эмбриолог отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. проф. Б.В. Леонова, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова МЗ РФ, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4,
sysoeva.a.p@gmail.com, https://orcid.org/0000-0002-6502-4498
Гаврилов Максим Юрьевич, м.н.с. отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. проф. Б.В. Леонова, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова МЗ РФ, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, maxgavr67@gmail.com,
https://orcid.org/0000-0001-6189-0287
Зингеренко Борис Владимирович, эмбриолог отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. проф. Б.В. Леонова, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова МЗ РФ, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4,
b_zingerenko@oparina4.ru, https://orcid.org/0000-0002-8784-5502
Шевцова Юлия Александровна, м.н.с. лаборатории клеточных технологий, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова МЗ РФ, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, u_shevtsova@oparina4.ru
Силачев Денис Николаевич, д.б.н., руководитель лаборатории клеточных технологий, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова МЗ РФ, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, d_silachev@oparina4.ru, https://orcid.org/0000-0003-0581-9755
Екимов Алексей Николаевич, к.м.н., заведующий лабораторией преимплантационного генетического тестирования и генетической диагностики, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова МЗ РФ, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, a_ekimov@oparina4.ru, https://orcid.org/0000-0001-5029-0462
Макарова Наталья Петровна, д.б.н., в.н.с. отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. проф. Б.В. Леонова, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова МЗ РФ, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4,
np_makarova@oparina4.ru, https://orcid.org/0000-0003-1396-7272
Кулакова Елена Владимировна, д.м.н., с.н.с. отделения вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. проф. Б.В. Леонова, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова МЗ РФ, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, e_kulakova@oparina4.ru, https://orcid.org/0000-0002-4433-4163
Калинина Елена Анатольевна, д.м.н, профессор, заведующая отделением вспомогательных технологий в лечении бесплодия им. проф. Б.В. Леонова, Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. акад. В.И. Кулакова МЗ РФ, 117997, Россия, Москва, ул. Ак. Опарина, д. 4, e_kalinina@oparina4.ru, https://orcid.org/0000-0002-8922-2878
Также по теме
