Метилирование гена WIF-1 при цервикальных плоскоклеточных интраэпителиальных поражениях
Цель исследования. Оценить диагностическую значимость метилирования промоторного участка гена WIF1 в развитии цервикальной интраэпителиальной неоплазии (Cervical intraepithelial neoplasia, CIN). Материал и методы. В исследование включены 62 пациентки в возрасте от 18 до 55 лет, обратившиеся в ФГБУ Научный центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. академика В.И. Кулакова МЗ РФ в период c февраля по август 2016 г. для обследования. Проводилась жидкостная цитология (ЖЦ), количественное и качественное тестирование на вирус папилломы человека (ВПЧ), гистологическое исследование биоптата шейки матки, расширенная кольпоскопия. Методом бисульфитного секвенирования был исследован уровень промоторного метилирования гена WIF1 в 62 образцах клеток, взятых из цервикального канала с помощью зонда «Cervix Brush». Результаты. Установлено, что в норме средний уровень метилирования промоторной области гена WIF1 составляет 2,3±5,4%. У женщин с диагнозами LSIL и HSIL наблюдалось статистически значимое по сравнению с нормой (р<0,0001) аномальное гиперметилирование промоторных участков гена WIF1 со средней частотой 29,2±17,2% и 54,8±18,7% соответственно. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о том, что уровень метилирования промоторного участка гена WIF1 достоверно коррелирует со стадией ВПЧ-ассоциированных заболеваний шейки матки. Таким образом, оценка статуса метилирования гена WIF1 может рассматриваться как потенциальный диагностический маркер цервикального канцерогенеза, а также прогностический клинический маркер в процессе комплексного лечения онкологических заболеваний шейки матки.Cухих Г.Т., Ашрафян Л.А., Байрамова Г.Р., Бабкина И.О., Чернова В.Ф., Осипьянц А.И., Королькова А.И., Полозников А.А., Асфарова Г.Р., Муллабаева С.М., Коган Е.А., Муйжнек Е.Л., Друх В.М., Киселев В.И.
Ключевые слова
цервикальная интраэпителиальная неоплазия (CIN)
Wnt-каскад
ген WIF1
ДНК-метилирование
эпигенетическая модификация
бисульфитное секвенирование
Список литературы
1. Zaravinos A., Mammas I.N., Sourvinos G., Spandidos D.A. Molecular detection methods of human papillomavirus (HPV). Int. J. Biol. Markers. 2009; 24(4): 215-22.
2. Коган Е.А., Файзуллина Н.М., Ли Ц., Демура Т.А., Жарков Н.В., Козаченко А.В., Байрамова Г.Р., Чернова В.Ф., Прилепская В.Н. Ранняя диагностика ВПЧ-ассоциированной патологии шейки матки у женщин до 30 лет и старше. Акушерство и гинекология. 2015; 9: 62-7. [Kogan E.A., Faizullina N.M., Li Ts., Demura T.A., Zharkov N.V., Kozachenko A.V., Chernova V.F., Bairamova G.R., Prilepskaya V.N. Early diagnosis of HPV-associated disease of the cervix uteri in women aged less than 30 years or older. Akusherstvo i Ginekologiya/Obstetrics and Gynecology. 2015; (9): 62-7. (in Russian)
3. Blatt A.J., Kennedy R., Luff R.D., Austin R.M., Rabin D.S. Comparison of cervical cancer screening results among 256,648 women in multiple clinical practices. Cancer Cytopathol. 2015; 123(5): 282-8. doi: 10.1002/cncy.21544.
4. Байрамова Г.Р., Файзуллин Л.З., Королькова А.И., Полозников А.А., Киселев В.И. Скрининг рака шейки матки: что нового в мировой практике? Акушерство и гинекология. 2016; 7: 17-21. http://dx.doi.org/10.18565/aig.2016.7.17-21
5. Киселев В.И. Молекулярные механизмы патогенеза гиперпластических и диспластических заболеваний репродуктивной системы и пути их фармакологической коррекции. В кн.: Прилепская В.Н., ред. Патология шейки матки и генитальные инфекции. М.: МЕДпресс-информ; 2008: 53-60.
6. Boyer S.N., Wazer D.E., Band V. E7 protein of human papilloma virus-16 induces degradation of retinoblastoma protein through the ubiquitin-proteasome pathway. Cancer Res. 1996; 56(20): 4620-4.
7. Thomas M., Pim D., Banks L. The role of the E6-p53 interaction in the molecular pathogenesis of HPV. Oncogene. 1999; 18(53): 7690-700. doi: 10.1038/sj.onc.1202953.
8. Uren A., Fallen S., Yuan H., Usubütün A., Küçükali T., Schlegel R. et al. Activation of the canonical Wnt pathway during genital keratinocyte transformation: a model for cervical cancer progression. Cancer Res. 2005; 65(14): 6199-206. doi: 10.1158/0008-5472.CAN-05-0455.
9. Curtin J.C., Lorenzi M.V. Drug discovery approaches to target Wnt signaling in cancer stem cells. Oncotarget. 2010; 1(7): 552-66. doi: 10.18632/oncotarget.101016.
10. Hsieh J.C., Kodjabachian L., Rebbert M.L., Rattner A., Smallwood P.M., Samos C.H. et al. A new secreted protein that binds to Wnt proteins and inhibits their activities. Nature. 1999; 398(6726): 431-6. doi: 10.1038/18899.
11. Ai L., Tao Q., Zhong S., Fields C.R., Kim W.-J., Lee M.W. et al. Inactivation of Wnt inhibitory factor-1 (WIF1) expression by epigenetic silencing is a common event in breast cancer. Carcinogenesis. 2006; 27: 1341–8. doi:10.1093/carcin/bgi379.
12. Yee D.S., Tang Y., Li X., Liu Z., Guo Y., Ghaffar S. et al. The Wnt inhibitory factor 1 restoration in prostate cancer cells was associated with reduced tumor growth, decreased capacity of cell migration and invasion and a reversal of epithelial to mesenchymal transition. Mol. Cancer. 2010; 9: 162. doi: 10.1186/1476-4598-9-162.
13. Delmas A.L., Riggs B.M., Pardo C.E., Dyer L.M., Darst R.P., Izumchenko E.G. et al. WIF1 is a frequent target for epigenetic silencing in squamous cell carcinoma of the cervix. Carcinogenesis. 2011; 32: 1625–33. doi:10.1093/carcin/bgr193.
14. Ramachandran I., Thavathiru E., Ramalingam S., Natarajan G., Mills W.K., Benbrook D.M. et al. Wnt inhibitory factor 1 induces apoptosis and inhibits cervical cancer growth, invasion and angiogenesis in vivo. Oncogene. 2012; 31(22): 2725-37. doi: 10.1038/onc.2011.455.
15. Urakami S., Shiina H., Enokida H., Hirata H., Kawamoto K., Kawakami T. et al. Wnt antagonist family genes as biomarkers for diagnosis, staging, and prognosis of renal cell carcinoma using tumor and serum DNA. Clin. Cancer Res. 2006; 12(23): 6989-97. doi: 10.1158/1078-0432.CCR-06-1194.
16. Issa J.P. Cancer prevention: epigenetics steps up to the plate. Cancer Prev. Res. (Phila) 2008; 1(4): 219-22. doi: 10.1158/1940-6207.CAPR-08-0029.
17. Esteller M. Epigenetics in cancer. N. Engl. J. Med. 2008; 358(11): 1148-59. doi: 10.1056/NEJMra072067.
18. Laird P.W. Cancer epigenetics. Hum. Mol. Genet. 2005; 14(Spec No): R65-76. doi: 10.1093/hmg/ddi113.
19. Deng Y., Yu B., Cheng Q., Jin J., You H., Ke R. et al. Epigenetic silencing of WIF-1 in hepatocellular carcinomas. J. Cancer Res. Clin. Oncol. 2010; 136(8): 1161-7. doi: 10.1007/s00432-010-0763-5.
20. Gao Z., Xu Z., Hung M-S., Lin Y-C., Wang T., Gong M. et al. Promoter demethylation of WIF-1 by epigallocatechin-3-gallate in lung cancer cells. Anticancer Res. 2009; 29(6): 2025-30.
21. Kumaki Y., Oda M., Okano M. QUMA: quantification tool for methylation analysis. Nucleic. Acids Res. 2008; 36: W170-5. doi:10.1093/nar/gkn294.
22. Van Der Meide W.F., Snellenberg S., Meijer C.J.L.M., Baalbergen A., Helmerhorst T.J.M., Van Der Sluis W.B. et al. Promoter methylation analysis of WNT/β-catenin signaling pathway regulators to detect adenocarcinoma or its precursor lesion of the cervix. Gynecol. Oncol. 2011; 123(1): 116-22. doi: 10.1016/j.ygyno.2011.06.015.
23. Kan Y.-Y., Liou Y.-L., Wang H.-J., Chen C.-Y., Sung L.-C., Chang C.-F. et al. PAX1 Methylation as a Potential Biomarker for Cervical Cancer Screening. Int. J. Gynecol. Cancer. 2014; 24: 928–34. doi:10.1097/IGC.0000000000000155.
24. Kato K., Long N.K., Makita H., Toida M., Yamashita T., Hatakeyama D. et al. Effects of green tea polyphenol on methylation status of RECK gene and cancer cell invasion in oral squamous cell carcinoma cells. Br. J. Cancer. 2008; 99: 647–54. doi:10.1038/sj.bjc.6604521.
Поступила 06.12.2016
Принята в печать 23.12.2016
Об авторах / Для корреспонденции
Cухих Геннадий Тихонович, д.м.н., профессор, академик РАН, директор ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-18-66. E-mail: g_sukhikh@oparina4.ru
Ашрафян Лев Андреевич, д.м.н., заслуженный врач РФ, профессор, руководитель лаборатории комбинированных методов лечения гинекологических заболеваний ФГБУ Российский научный центр рентгенорадиологии Минздрава России. Адрес: 117485, Россия, Москва, Профсоюзная ул., д. 86. Телефон: 8 (985) 740-27-45
Байрамова Гюльдана Рауфовна, д.м.н., зав. по клинической работе научно-поликлинического отделения отделом по клинической работе ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России. Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-18-66. E-mail: g_bairamova@oparina4.ru
Бабкина Ирина Олеговна, лаборант-исследователь лаборатории инфекционной иммунологии ФГБУ ФНКЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ГСП-7, ул. Саморы Машела, д. 1. Телефон: 8 (495) 287-65-70, доб. 5509. E-mail: iobabkina@gmail.com
Чернова Виктория Федоровна, аспирант поликлинического отделения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (495) 438-18-66. E-mail: v_chernova@oparina4.ru
Осипьянц Андрей Игоревич, научный сотрудник лаборатории биохимии и энзимологии ФГБУ ФНКЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ГСП-7, ул. Саморы Машела, д. 1. Телефон: 8 (903) 294-74-14. E-mail: osssip@gmail.com
Королькова Анна Игоревна, аспирант I года обучения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (915) 322-08-79. E-mail: zaikinaai@icloud.com
Полозников Андрей Александрович, к.х.н., зав. лабораторией биохимии и энзимологии ФГБУ ФНКЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ГСП-7, ул. Саморы Машела, д. 1. Телефон: 8 (495) 287-65-70, доб. 5509. E-mail: andrey.poloznikov@gmail.com
Асфарова Гунай Раисовна, аспирант I года обучения ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (926) 262-11-13. E-mail: gunyt@mail.ru
Муллабаева Светлана Мининхаевна, зав. лабораторией по сбору и хранению биоматериалов ФГБУ НЦАГиП им. академика В.И. Кулакова Минздрава России.
Адрес: 117997, Россия, Москва, ул. Академика Опарина, д. 4. Телефон: 8 (915) 322-08-79. Е-mail: s_mullabaeva@oparina4.ru
Коган Евгения Александровна, д.м.н., профессор кафедры патологической анатомии имени академика А.И. Струкова ФГБОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России. Адрес: 119991, Россия, Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 2. Телефон: 8 (499) 248-01-81. Е-mail: expedition@mma.ru
Муйжнек Екатерина Леонидовна, к.б.н., директор по науке, ЗАО «МираксБиоФарма».
Адрес: 121248, Россия, Москва, Кутузовский пр-т, д. 12, стр. 2. Телефон: 8 (495) 721-20-58. E-mail: MuyzhnekEL@ilmixgroup.ru
Друх Вадим Михайлович, к.м.н., руководитель научных проектов Института медико-биологических проблем ФГАОУ ВО РУДН.
Адрес: 117198, Россия, Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 6. Телефон: 8 (495) 721-20-58. E-mail: druhvm@gmail.com
Киселев Всеволод Иванович, д.б.н., профессор, член-корр. РАН, главный научный сотрудник Научно-исследовательского отдела раннего канцерогенеза, профилактики, диагностики и комплексного лечения онкологических заболеваний женских репродуктивных органов ФГБУ Российский научный центр рентгенорадиологии Минздрава России. Адрес: 117485, Россия, Москва, Профсоюзная ул., д. 86. Телефон: 8 (985) 776-31-16. E-mail: vkis10@mail.ru
Для цитирования: Cухих Г.Т., Ашрафян Л.А., Байрамова Г.Р., Бабкина И.О., Чернова В.Ф., Осипьянц А.И., Королькова А.И., Полозников А.А., Асфарова Г.Р., Муллабаева С.М.,
Коган Е.А., Муйжнек Е.Л., Друх В.М., Киселев В.И.
Метилирование гена WIF1 при цервикальных плоскоклеточных
интраэпителиальных поражениях. Акушерство и гинекология. 2017; 5: 114-23.
http://dx.doi.org/10.18565/aig.2017.5.114-23
Также по теме
