Актуальность
Рак яичников занимает второе место в структуре смертности женщин от онкогинекологических заболеваний, уступая лишь раку молочной железы. За 10 лет заболеваемость увеличилась на 11.9%. Отсутствие специфических клинических и диагностических маркеров для опухолей яичников, латентное течение и низкая выявляемость заболевания на ранних стадиях приводят к неоптимальным результатам лечения у данной группы пациенток. В связи с этим пятилетняя выживаемость при всех стадиях не превышает 35%. В последние десятилетия идентификации биомаркеров рака яичников было посвящено множество исследований, в результате которых было выявлено большое количество потенциальных претендентов, идентифицированных геномными и протеомными технологиями. Однако, разработанные методики скрининга и первичной диагностики сопряжены с большими финансово-экономическими затратами и не показали значимой эффективности. В связи с этим не вызывает сомнений необходимость систематизации обширных клинических знаний в отношении опухолей яичников, имеющихся в распоряжении акушеров-гинекологов и онкологов, исследования актуальных методов диагностики этих заболеваний и разработки наиболее приемлемых алгоритмов для эффективного их выявления и мониторинга. Изменение метаболизма является характерным признаком злокачественных новообразований. Существенная трансформация конформации молекулы альбумина наблюдается у больных раком, что было показано с использованием флюорисцентных методов и спектроскопии электронного парамагнитного резонанса (ЭПР). В клинических исследованиях онкологических пациентов было выявлено специфическое изменение конформации альбумина, детектируемое методом ЭПР, что может быть использовано для ранней диагностики злокачественных опухолей с достаточно высокой чувствительностью и специфичностью.
Цель исследования
Оценить диагностические возможности показателей конформационных характеристик альбумина сыворотки крови для дифференциальной диагностики ЭОЯ.
Материалы и методы
В пилотное проспективное исследование включены 28 пациенток в возрасте от 23 до 64 лет, из них 12 пациенток с впервые выявленным раком яичников I-IIIC стадии, 10 больных с доброкачественными эпителиальными опухолями яичников (ЭОЯ) и 6 пациенток с пограничными ЭОЯ. Всем пациентам производился забор крови при поступлении в стационар до начала лечения. Анализировали результаты исследования проб сыворотки крови пациентов, собранных в ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр акушерства, гинекологии и перинатологии им. В.И. Кулакова» Минздрава России, измеренных методом АТА-тест. Пробы сыворотки были отобраны и аликвотированы, затем хранились в замороженном виде до исследования. Исследование аликвот методом АТА-тест производили: – в лаборатории ФГБУ им. В.И. Кулакова в течение 2019 г., – в лаборатории ФГБУ им. В.И. Кулакова с участием представителей предприятия «Альбутран» – 16 и 17 января 2020 г., – в лаборатории предприятия «Альбутран» – 20 и 21 января 2020 г. Полученные результаты были собраны в сводную таблицу, которая включает данные измерений на анализаторе АХМ-09 (ООО»Альбутран-М», Россия) в лаборатории ФГБУ им. В.И. Кулакова за 2019 г., и данные измерений на анализаторе АХМ-09 (ООО»Альбутран-М», Россия) в лаборатории предприятия «Альбутран» за 20 и 21 января 2020 г. Оценивалось 3 ключевых параметра: DR (дискриминантный параметр), характеризующий конформацию сывороточного альбумина; RTQ (транспортная эффективность), отображающая интегральную эффективность реализации альбумином последовательности основных операций по транспортировке жирных кислот; DTE (детоксикационная активность), характеризующая эффективность связывания и эвакуации эндотоксинов клетками печени. Пробы для исследования готовили смешиванием сыворотки крови (по 50 мкл) с растворами спинового зонда 16–доксил стеариновой кислоты в этаноле (концентрации 5,8 ммоль/л и 7,5 ммоль/л) в микропланшетах, смесь инкубировали при 37°С в течение 10 мин при непрерывном встряхивании в шейкере. После инкубации смесь переносили в стеклянные капилляры и исследовали на анализаторе.
Для анализа результатов применяли непараметрический U-критерий Манна-Уитни, а также проводили дискриминантный и ROC-анализ с вычислением площади под ROCкривой (AUC) и точек cut-off для статистически значимых показателей, разделяющих с максимальной диагностической чувствительностью (SE) и специфичностью (SP).
Результаты
Таблица 1. Описательная статистика показателя DR в обследованных группах пациентов, по данным измерений 2019 года (данные измерений 2020 года не включены)
|
Группа пациентов |
Количество пациентов |
Показатель DR |
|||
|
Среднее значение |
Медиана |
Стандартное отклонение (SD) |
|||
|
1 |
Пациенты с доброкачественными и пограничными опухолями |
16 |
1,58 |
1,65 |
0,91 |
|
2 |
Пациенты с ЗНО* |
12 |
0,83 |
0,77 |
0,41 |
*) Достоверно различие (р<0,05) по сравнению с группой “Пациенты с ЗНО”
Полученные результаты различия признака статистически значимы (р<0,05). Эти данные можно объяснить изменениями структурно-функционального состояния альбумина, а также его сниженной конформационной подвижностью и лабильностью ввиду блокировки связывающих центров молекулы различными опухолевыми метаболитами и токсическими лигандами.
Это позволяет рекомендовать к использованию показатели DR в ранней диагностике ЗОЯ.
Интегральная информативность теста (AUC-область под ROC-кривой) при сравнении групп доброкачественных опухолей яичников с раком яичников составляет 0,746 (74,6%).
Оптимальное значение cut-off равно 1,25. При этом тест имеет чувствительность SE=83,3% и специфичность SP=60,0%. Диагностическая точность теста составляет 77,7%.
Заключение
Результаты пилотного теста демонстрируют, что в сыворотке крови больных раком яичников показатели конформационных характеристик альбумина отличны от таковых при пограничных и доброкачественных опухолях. Полученные данные позволяют предположить, что после накопления достаточного количества материала, а также анализа результатов в группе здоровых женщин, данная система будет применима в ранней диагностике больных РЯ, а также позволит улучшить диагностическую информативность существующих методов.
