Гликопротеины крови участвуют в коммуникационных сборках, модулирующих функциональную активность комплексов. Цель: на основе собственных данных суммировать потенциал функционального анализа изотипов С4В и С4А, С1-ингибитора крови в мониторинге врожденного иммунитета, прогностике и диагностике болезней.
Методы. Использовали собственные методы функционального твердофазного (в микропанели и на блоте) иммуноферментного (пероксидазного цветного и хемилюминесцентного в живом изображении в системе BioChemi System, UVP) анализа (ФТИФА) С4В, С4А и С1-ингибитора сыворотки крови здоровых доноров и пациентов. Белок окрашивали посредством SYPRO Protein Blot Stain (Bio-Rad Lab).
Результаты. 1. Разработаны варианты микропанельного ФТИФА изотипов (одновременное определение С4В и С4А), С1-ингибитора. Предложенный алгоритм оценки дефицитов функционально активных компонентов комплемента применен в прогностике и диагностике болезней язв желудка и двенадцатиперстной кишки, системной красной волчанки, фосфолипидного синдрома, ревматоидного артрита, отеков и других. Взаимодействие изотипов с гликоконъюгатами (ГК: агрегированным IgG, ЛПС) проходило по типу лектин-ГК-распознавания. Выявлено функциональное сходство изотипов с WGA и PHA – фитолектинами с противоопухолевым действием. 2. Разработаны хемилюминесцентные варианты ФТИФА изотипов и их субизотипов (до 5–7 форм в изотипе) на блоте в новой – сборочной диагностико-прогностической pI-области на блоте после изоэлектрофокусирования сыворотки (0,3–7 мкл) в полиакриламидном геле в градиенте рН 3-5. Описано контролируемое десиалирование сывороток, повышающее диагностический потенциал. Высокогликозилированный С1-ингибитор обнаруживался в области pI-форм С4В, что указывало на кофункционирование ингибитора и субизотипов С4В. Количественный ФТИФА на блоте позволял ранжировать сыворотки пациентов по абсолютным значениям С4, С4В, С4А; выявлять полные дефициты С4 (С4А+С4В), С4В или С4А; группировать сыворотки с относительно небольшими дефицитами С4 с преимущественным содержанием С4В или С4А, что важно для установления тенденций риска болезней. 3. Результаты ФТИФА соотношения их частичных дефицитов С4В и С4А в микропанели и на блоте подтверждали друг друга.
Выводы. 1. Результаты указывают на перспективы ФТИФА С4В, С4А и С1-ингибитора сывороток и пуповинной крови в прогностике и диагностике болезней. 2. Перспективно рассмотрение (суб)изотипов и их комплексов как распознающих гликопаттерны потенциальных терапевтических белков. 3. Открыта перспектива каскадного типирования субизотипов с помощью антител и ГК (www.lectinity.com) для расширения возможностей и повышения чувствительности прогностики и диагностики болезней.
